| 研究課題/領域番号 |
09680625
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
機能生物化学
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
本川 雄太郎 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 教授 (40004585)
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| 研究分担者 |
池田 和子 徳島大学, 分子酵素学研究センター, 助手 (10108863)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
1998年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
1997年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
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| キーワード | リポ酸転移酵素 / リポ酸 / 遺伝子構造 / 遺伝子マッピング / クローニング / 発現 / cDNA / lipoate-protein ligase |
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| 研究概要 |
リポ酸はグリシン開裂酵素系のH蛋白およびピルビン酸、α-ケトグルタル酸、分枝鎖ケト酸脱水素酵素複合体のアシル転移酵素の補酵素である。我々はリポ酸を蛋白質に結合させる反応を触媒するリポ酸転移酵素をウシ肝から精製し、その性質を既に報告した。
本研究ではウシおよびヒトリポ酸転移酵素のcDNAを得て以下の結果を得た。
1) ウシリポ酸転移酵素のcDNAは1119bpのopen reading frameを含み、373アミノ酸残基から成る前駆体蛋白質をコードしていた。
2) ヒトリポ酸転移酵素のcDNAも1119bpのopen reading frameを含み、前駆体は373アミノ酸残基から成る。ウシ酵素との比較から、前駆体は26アミノ酸残基から成るpresequenceを持つものと思われ、推定される成熟型酵素は347アミノ酸残基から成り、分子質量は39,539Daである。ヒトリポ酸転移酵素のアミノ酸配列はウシのそれと88%、大腸菌のlipoate-protein ligase Aのアミノ酸配列と31%の相同性を示した。
3) Poly(A)^+RNAのNorthern解析により、ヒトリポ酸転移酵素のmRNAは1.5kbであった。mRNAの組織分布を検討したところ筋と心に多く認められ、リポ酸を結合している蛋白質の組織分布と一致した。
4) ヒトリポ酸転移酵素の遺伝子は4個のexonと3個のintronから構成されており、大きさは約8kbであった。ヒトリポ酸転移酵素遺伝子は第二染色体のq11.2に存在することがFISH法で明らかとなった。
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