| 研究概要 |
生体膜・膜蛋白質の構造解析に不可欠な精製・結晶化には,相分離現象などに関する理解が求められる.本研究では,主に脊椎動物網膜の視細胞膜の分画過程を通じて見られる,これらの現象に関して,詳細に研究を行った.具体的には,光受容膜蛋白質であるロドプシシの選択的可溶化・三次元結晶化を実現するための様々な要因(界面活性剤,塩,pH,温度,添加剤等)の効果を調べた.その結果,実用的な,高度に選択的な可溶化法の完成・及びそのメカニズムの考察に基づく一般化の方向性を確立するに到った.これは,脂質二重膜間相互作用が極めて強くなる溶媒条件下での,Lα-HII等の脂質の相転移を想定した.最小界面活性剤量での選択的可溶化,と言うことが出来る.一般的に,逆錐形状を持つ脂質の含量がある程度の割合を占めるような生体膜画分の場合,視細胞系に関して得られた詳細な研究結果をもとにして,今後のA研究を更に発展させることが可能と思われる.一方,副次的な研究成果として得られた。ロドプシンの3次元結晶化の条件を精密化し,2つの結晶形(双ピラミッド状,四角棒状)について,大型放射光施設(PhotonFactory.SPring-8)でのクライオX線回折測定を行った.特に,四角棒状結晶については,結晶の長軸方向には,5A分解能を超える反射が確認された.また,単位格子中のロドプシン分子の数,配同等に関する情報が得られた.今後,更に抗凍結剤の条件等を改善することにより,より高分解能のデータ収集・構造解析が行える可能性があると考えられる.
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