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ガングリオシドGT1bとGQ1bは神経細胞シナプスの特異マーカーか?

研究課題

研究課題/領域番号 09680756
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 神経解剖学・神経病理学
研究機関(財)東京都臨床医学総合研究所

研究代表者

小山内 たか  財団法人東京都臨床医学総合研究所, 生命情報研究部門, 研究員 (60126018)

研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
800千円 (直接経費: 800千円)
1998年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
キーワードガングリオシド / P19細胞 / 神経分化細胞 / シアル酸転移酵素 / シナプス形成 / growth cone / GAP-43 / シナプトフィシン / 多能性幹細胞 / レチノイン酸
研究概要

平成9年度の成果: ガングリオシドの神経系への分化過程での役割を明らかにする一貫として、レチノイン酸の刺激によって神経細胞へと分化する多能性幹細胞(P19)の系を用いて、ガングリオシドの分子種を検索した。GD3とシナプス形成のマーカーであるGT1bは未分化細胞、凝集塊細胞、そして神経分化細胞へと増加した。一方、GQ1bは凝集塊細胞と神経分化細胞のみに検出されたのが、特徴的であった。細胞の免疫染色の結果、GT1b抗体で、未分化細胞から神経細胞まで染色され、神経分化細胞の神経突起や軸索が染色された。GD3、GT1b、GQ1b合成酵素活性の変化において、そのレベルは凝集塊細胞、神経分化細胞で高くなり、神経分化ヘコミットした時期に昂進することが判った。ノーザンブロットの結果、凝集塊細胞、神経分化細胞でGD3合成酵素mRNAの高い発現が認められ、このGD3合成酵素活性の増加はレチノイン酸による神経分化の過程で誘導されたことを示唆した。
平成10年度の成果: シナプス形成の特異マーカーであるGAP-43分子とシナプトフィシン分子の局在を神経分化細胞で調べた。ショ糖密度勾配法によりgrowth coneとシナプトソームの画分を調製した。growth cone画分の純度は抗GAP-43抗体で、シナプトソーム画分の純度は抗シナプトフィシン抗体を用いて、ウエスタン・ブロット法で確認した。また、神経細胞分化マーカーであるN-CAM分子の存在もウエスタン・ブロット法で確認出来た。神経細胞の固定剤はマトリゲルが最適であった。免疫染色の共焦点顕微鏡写真から、抗GQlb抗体の染色では、神経分化細胞の軸索のgrowth coneで強く染色され、GAP-43抗体の染色像と酷似していた。抗GTlb抗体の染色では、抗シナプトフィシン抗体のシナプスの染色像と酷似していた結果を得た。抗GTlb抗体、抗GQlb抗体と抗GAP-43抗体、抗シナプトフイシン抗体の組み合わせで二重染色を行い、各々の相互の分子の局在を比較検討した。

報告書

(3件)
  • 1998 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (13件)

  • [文献書誌] Taka Osanai: "Retinoic acid induces the expression of GD3 synthase mRNA during the differentiation process in murine embryonal carcinoma cell line P19 cells" Chemistry and Physics of Lipids. 82・2. 146 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taka Osanai: "Glycolipid sialytransferases are enhanced during neural differentiation of mouse embryonic carcinoma cells,P19" Biochem.Biophys.Res.Commun.241・2. 327-333 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 小山内たか: "レチノイン酸による神経細胞分化誘導とGD3合成酵素遺伝子の発現" 神経化学. 36・3. 276 (1997)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 小山内たか: "P19神経細胞分化におけるLewis xエピトープ糖脂質について" 神経化学. 37・3. 359 (1998)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Taka Osanai: "Retinoic acid induces the expression of GD3 synthase mRNA during the differentiation process in murine embryonal carcinoma cell line P19 cells" Nuerochemical Research. 24・1. 175 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] TAKA OSANAI: "RETINOIC ACID INDUCES THE EXPRESSION OF GD3 SYNTHASE MRNA DURING THE DIFFERENTIATION PROCESS IN MURINE EMBRYONAL CARCINOMA CELL LINE P19 CELLS" CHEMISTRY & PHYSICS OF LIPIDS. 82. 146 (1997)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] TAKA OSANAI: "GLYCOLIPID SIALYLTRANSFERASES ARE ENHANCED DURING NEURAL DIFFERENTIATION OF MOUSE EMBRYONIC CARCINOMA CELLS,P19" BIOCHEM.BIOPHYS.RES.COMMUN.241. 327 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] TAKA OSANAI: "RETINOIC ACID INDUCES THE EXPRESSION OF GD3 SYNTHASE MRNA DURING THE DIFFERENTIATION PROCESS IN MURINE EMBRYONAL CARCINOMA CELL LINE P19 CELLS" NUEROCHEMICAL RES.24. 175 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1998 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 小山内たか: "P19神経細胞分化におけるLewis x エピトープ糖脂質について" 神経化学. 37・3. 359 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Taka Osanai: "Retinoic acid induces the expression of GD3 synthase mRNA during the differentiation process in murine embryonal carcinoma cell line P19 cells" Nuerochemical Research. 24・1. 175 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Taka Osanai: "Glycolipid sialyltransferases are enhanced during neural differentiation of mouse embryonic carcinoma cells,P19" Biochem.Biophys.Res.Commun.241・2. 327-333 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Taka Osanai: "Retinoic acid induces the expression of GD3 synthase mRNA during the differentiation process in murine embryonal carcinoma cell line P19 cells" Chemistry and Physics of Lipids. 82・2. 146 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] 小山内たか: "レチノイン酸による神経細胞分化誘導とGD3合成酵素遺伝子の発現" 神経化学. 36・3. 276 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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