| 研究課題/領域番号 |
09770115
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| 研究種目 |
奨励研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
人体病理学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
根本 哲生 (根本 哲夫) 医科歯科大, 医学部附属病院, 助手 (70242203)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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| 研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1998年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1997年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | (プロテイン)チロシンフォスファターゼ(PTP) / 変性プライマー / RT-PCR / 食道癌 / ノザン解析 |
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| 研究概要 |
【目的】
細胞のシグナル伝達を制御するプロテインチロシンフォスファターゼ(PTP)の機能解析が近年急速に進みつつあるが、ヒト癌におけるその発現と意義は不明な点が多い。今回の研究ではヒト食道癌培養細胞及び手術材料におけるPTPの発現を検討した。
【材料と方法】
ヒト食道癌培養細胞(T.T株)よりmRNAを抽出、cDNAを合成した。多くのPTPsの間で保存されているcatalytic domainに対して変性プライマーを作成しRT-PCRを行った。増幅されたフラグメントをプラスミドベクターに挿入、得られたクローンの塩基配列を決定、結果をデータベースにより照合し、PTPの種類を同定した。さらに、得られたPCR産物をプローブとしたノザン解析により、ヒト食道癌手術症例の癌部・非癌部における各種PTP発現を比較検討した。
【結果】
今回、以下の8種類のPTPをヒト食道癌培養細胞において同定した。受容体型のPTPRG、PTPκ、PTPε、非受容体型のPTP1B、PEZ、PTPH1、PTPD1、PTPMEGである。現在のところ未知のPTPクローンは得られていない。手術例のノザン解析ではPTPκ、PTP1B及びPTPH1の発現が比較的強く見られた。癌部と非癌部での発現は、ほぼ同程度と考えられた。
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