研究課題/領域番号 |
09770193
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研究種目 |
奨励研究(A)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
細菌学(含真菌学)
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研究機関 | 国立感染症研究所 |
研究代表者 |
和田 昭仁 感染研, 研究員 (40270657)
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研究期間 (年度) |
1997 – 1998
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研究課題ステータス |
完了 (1998年度)
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配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1998年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1997年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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キーワード | 黄色ブドウ球菌 / 細胞壁合成酵素 / バンコマイシン |
研究概要 |
黄色ブドウ球菌(S.aureus)は4つの細胞壁合成酵素penicillin-binding protein(PBP)を持っている。また、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌はこれらのPBPに加え、PBP2'と呼ばれる新たなPBPをもっている。これらのPBPはベータラクタム系抗生剤の作用点であり、同時にこの系統の薬剤に対する耐性の原因となっている。研究者は、S.aureusの染色体DNAで形質転換された大腸菌をバンコマイシンで選択することによりS.aureusのPBP1の遺伝子pbpAをクローニングし、その遺伝子の塩基配列を1994年に公表した(GenBank/EMBL/DDBJ accession numbers D28879 and A007500)。今回の研究では、pbpAがS.aureusの増殖に必須であるかどうかを調べるため、大腸菌の中では複製できるが、S.aureusの中では複製できない自殺ベクターを用い、染色体上のpbpAとの間の相同組み替え体が得られるかどうかを検討した。対照としてもちいた遺伝子の欠損を起こさない自殺ベクターからは、組み替え体が得られたが、pbpA欠損株は得られなかった。染色体外に欠損のないpbpAが存在するときは、上記の自殺ベクターにより染色体上のpbpA欠損株が得られた。次に、プラスミド不和合性の系をもちいて、染色体外のpbpAを排除しようと試みたが、染色体上のpbpAが欠損している株では、染色体外のpbpAを排除できなかった。以上の結果より、S.aureusのPBP1遺伝子pbpAはその増殖に必須であるとの結論を得た。
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