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アポトーシスによる心筋細胞の電気生理的特性の変化の検討

研究課題

研究課題/領域番号 09770480
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 循環器内科学
研究機関名古屋大学

研究代表者

安井 健二  名古屋大学, 環境医学研究所, 助手 (70283471)

研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
1998年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1997年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
キーワードアポトーシス / 心筋細胞 / イオンチャネル / スフィシゴシン / 細胞密度
研究概要

中間報告書のごとく、1)成熟ラット培養心室筋細胞の実験では、アポトーシス誘発物質であるスフィンゴシンにより処理した細胞ではL-type Ca電流が有意に抑制された。その電流密度は、コントロールで、5.7pA/pF,スフィンゴシン1μMで2.9pA/pF、3μMで2.7p,A/pF、10μMで2.4pA/pFであり、電流量も容量依存的に減少をきたし、アポトーシス細胞では心筋収縮に重要な役割を果たす細胞外からのCa流入が傷害をうける事が判明した。
2)新生児ラット培養心室筋細胞を用いた実験では、Cell-cell interactionが心筋細胞のアポトーシスの抑制に関わっていることを解明した。以下に詳細を記載する。
TUNEL法によるアポトーシス発生率は、培養細胞密度がconfluentの場合低く、sparseの場合高率である。まず培養液をconfluentの培養液で置換すると、アポトーシスが抑制される点から、培養細胞から分泌される未知の因子が、自身の生存を維持させる可能性が判明した。次にgap junctionを介する細胞間のコミュニケーションがアポトーシス抑制に働く可能性を調べるため、コネキシン43のantisenseによる検討を行った。Antisense群ではコネキシン43蛋白の発現は70%ほどに抑制されることを、Westernブロットで確認した。免疫組織染色では、コネキシン43蛋白発現が抑制された細胞でTUNEL法陽性の細胞が多かった。以上より、Gapjunctionおよび細胞から分泌される液性因子の両者の系を介して、Cell-cell interactinが心筋細胞の生存に大きな役割を果たしていることが判明した。

報告書

(2件)
  • 1998 実績報告書
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Kenji YASUI et al.: "L-TYPE Ca^<2+> Current in Sphingosine-treated Cultured Rat Ventricular Myocytes" Environmental Medicine. 42・1. 26-29 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kenji YASUI et al.: "Cell-Cell Interaction Inhibits Apoptosis of Cultured Myocytes" Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 30・11. A302 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kenji YASUI et al.: "Expression of Bcl-2 and Bax Proteins in Cultured Neonatal Cardiac Myocytes" Environmental Medicine. 41・1. 63-64 (1997)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 安井 健二: "循環器とアポトーシス" 循環器専門医. 5・2. 351-358 (1997)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kenji YASYUI,Yukiya,Ono,Kenji KADA,Junji TOYAMA:"Expression of Ncl-2 and Bax Proteins in Cultured Neonatal Cardiac Myocytes." Environmental Medicine. 41・1. 351-358 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] 安井 健二: "循環器とアポトーシス" 循環器専門医. 5・2. 351-358 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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