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強皮症線維芽細胞におけるコラーゲン遺伝子転写活性化責任領域の解明

研究課題

研究課題/領域番号 09770610
研究種目

奨励研究(A)

配分区分補助金
研究分野 皮膚科学
研究機関国立国際医療センター (1998)
東京大学 (1997)

研究代表者

玉木 毅  国立国際医療センター研究所, 研究員 (20207228)

研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1998年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1997年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
キーワード汎発生強皮症 / コラーゲン / 転写調節 / 線維芽細胞 / NF-kB / 汎発性強皮症 / NF-κB
研究概要

昨年度コラーゲンa2鎖のプロモーター領域を有するCATプラスミド(COL1A2-CAT)及びその切断変異を強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞にtransfectして強皮症線維芽細胞におけるプロモーター活性化が消失する領域の同定を試みたが、各実験間および強皮症線維芽細胞と正常線維芽細胞間のtransfectionの効率のばらつきが大きく、transfectionの効率を全体的に上昇させる目的でlipofectinを用いた高効率の方法に切り替えて同様の検討を行なった。これによりtransfectionの効率は全体に上昇したものの、結局結果のばらつきは避けられなかった。したがってdeletion analysisのみによりプロモーター上の責任領域を同定することには限界があると思われ、他のassay系により関与する転写因子をある程度絞り込んだ上でsite-specific mutantの作成による検討を行なわねば安定した結果を得ることは困難ではないかと考えられた。しかし、この方向の検討も関与する転写因子が全く未知のものである場合には無効であり、さらに多様な方向からの検討が必要と思われる。
また昨年度、強皮症線維芽細胞の核抽出液において正常に比してより強いNF-kB consensussequenceへの結合能が認められた。そこで、コラーゲンa2鎖プロモーター領域上でNF-kBconsensus sequenceと類似の配列を検索したが、通常のstringencyでの検索では本研究で検討している配列上にはconsensus sequence類似の配列が存在しなかった。consensusの配列が存在しなくても実際には結合する可能性はあり、NF-kBを直接コラーゲンa2鎖プロモーターのoligonucleotideに結合させて検討することを計画している。

報告書

(2件)
  • 1998 実績報告書
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (2件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (2件)

  • [文献書誌] Fujimoto M, et al.: "Distribution of anti-p80-coilin autoantibody in collagen diseases and various skin diseases" British Journal of Dermatology. 137. 916-920 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Fujimoto M, et al.: "Prevalence and clinical relevance of 52-kDa and 60-kDa Ro/SS-A auroantibodies in Japanese patients with systemic sclerosis" Annals of the Rheumatic Diseases. 56. 667-670 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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