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ヒトPTH受容体遺伝子の導入によるヒト破骨細胞形成系の確立

研究課題

研究課題/領域番号 09877355
研究種目

萌芽的研究

配分区分補助金
研究分野 機能系基礎歯科学
研究機関昭和大学

研究代表者

須田 立雄  昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)

研究分担者 自見 英治郎  昭和大学, 歯学部, 助手 (40276598)
宇田川 信之  昭和大学, 歯学部, 講師 (70245801)
新木 敏正  昭和大学, 歯学部, 講師 (90138420)
高橋 直之  昭和大学, 歯学部, 助教授 (90119222)
宇田川 信之  昭和大学, 歯学部, 講師 (20138382)
研究期間 (年度) 1997 – 1998
研究課題ステータス 完了 (1998年度)
配分額 *注記
1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1998年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1997年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
キーワード破骨細胞 / 骨芽細胞 / SaOS-2 / 破骨細胞分子因子(ODF) / PTHレセプター / M-CSF / ヒト抹消血単核細胞 / 共存培養 / ヒト抹消血 / 副甲状腺ホルモン / PTH / ヒト破骨細胞
研究概要

ヒト骨芽細胞SaOS-2細胞にPTH受容体遺伝子を導入したSaOS-4/3細胞を樹立し、更に本細胞を用いヒト破骨細胞形成系を確立した。
(1) 株化ヒト骨芽細胞SaOS-2にPTH受容体遺伝子を導入した細胞SaOS-4/3細胞を樹立した。親株のSaOS-2細胞をPTHで処理してもcAMPの産生亢進は殆ど起こらなかったが、SaOS-4/3細胞のcAMP産生能はPTHに反応して著しく上昇した。
(2) SaOS-4/3細胞とマウスの脾細胞の共存培養系に各種の骨吸収因子(PTH、1α,25(OH)2D3、PGE2、IL-6+可溶性IL-6受容体)を添加し、破骨細胞の形成を評価した。破骨細胞の形成はPTH添加により促進されたが、他の骨吸収因子は破骨細胞の形成を全く促進しなかった。一方、親株SaOS-2細胞とマウス脾細胞の共存培養系においては、PTHを含む各種の骨吸収因子は破骨細胞の形成を促進しなかった。
(3) ヒト末梢血単核細胞をSaOS-4/3細胞と共存培養すると、PTHに反応してヒト破骨細胞が形成された。象牙質切片上でPTHの存在下でこの共存培養を行うと切片上に多数の吸収窩が形成された。
(4) マウスの共存培養系と同様に、ヒト末梢血単核細胞とSaOS-4/3細胞の共存培養系における破骨細胞形成はGM-CSFにより強力に抑制された。また、M-CSF抗体によりマウスとヒトの破骨細胞形成は抑制された。
(5) SaOS-4/3細胞はPTH処理により破骨細胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)のmRNAの発現が誘導された。一方、親株SaOS-2細胞ではODF mRNAの発現は誘導されなかった。

報告書

(2件)
  • 1998 実績報告書
  • 1997 実績報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] Suda,T.,et al.: "Modulation of osteoclast differentiation and function by osteoblasts/stromal cells." Endocrine Rev.,. in press. (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Takahashi,N.,et al.: "A new member of TNF ligand family,ODF/OPGL/TRANCE/RANKL regulates osteoclast differentiation and function." Biochem.Biophys.Res.Commun.,. in press. (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuzaki,K.,et al.: "Human osteoclast-like cells are formed from peripheral blood mononuclear cells in a coculture with SaOS-2 cells transfected with the parathyroid hormone (PTH)/PTH- related protein receptor gene." Endocrinology. 140. 925-932 (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuzaki,K.,et al.: "Osteoclast differentiation factor (ODF) induces osteoclast-like cell formation in human peripheral blood mononuclear cell cultures." Biochem.Biophys.Res.Commun.246. 199-204 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Yasuda,H.,et al.: "Osteoclast differentiation factor is a ligand for osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor and identical to TRANCE/RANKL." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 3597-3602 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Nakamura,I.,et al.: "Src-dependent tyrosine phosphorylation of p130^<Cas> is required for actin ring formation in osteoclasts." J.Biol.Chem.273. 11144-11149 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Isogai,Y.,et al.: "Parathyroid hormone regulates osteoblast differentiation positively or negatively depending on the diffrentiation stages." J.Bone Miner.Res.11. 1384-1393 (1996)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Jimi,E.,et al.: "Osteoclast function is activated by osteoblastic cells through a mechanism involving cell-to-cell contact." Endocrinology. 137. 2187-2190 (1996)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Nakamura,I.,et al.: "Lack of vacuolar proton ATPase association with the cytoskeleton in osteoclasts of osteosclerotic (oc/oc) mice." FEBS Lett.401. 207-212 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Suda,T.,et al.: "Regulation of osteoclast function." J.Bone Miner.Res.12. 869-879 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] Ishizuya,T.,et al.: "Parathyroid hormone experts disparate effects on osteoblast differntiation depending on exposure time in rat osteoblastic cells." J.Clin.Invest.99. 2961-2970 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書
  • [文献書誌] kawasaki,K.,et al.: "Osteoclasts are present in gp 130-deficient mice." Endocrinology. 138. 4959-4965 (1997)

    • 関連する報告書
      1997 実績報告書

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公開日: 1997-04-01   更新日: 2016-04-21  

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