小児悪性腫瘍の国際共同研究

• 研究課題/領域番号: 10042001
• 研究種目: 特定領域研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: がん調査
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 林 泰秀 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (30238133)
• 研究分担者: 別所 文雄 東京大学, 医学部・附属病院, 助教授 (40010285) ; LOOK Thomas St. Jude小児研究病院, 教授 ; SHIMADA Hiro ロサンゼルス小児病院, 教授 ; 小林 美由紀 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60205391) ; 柳澤 正義 東京大学, 医学部・附属病院, 教授 (90049031)
• 研究期間 (年度): 1998 – 2000
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 9,800千円 (直接経費: 9,800千円); 1999年度: 4,500千円 (直接経費: 4,500千円); 1998年度: 5,300千円 (直接経費: 5,300千円)
• キーワード: 神経芽腫 / 小児悪性腫瘍 / DCC遺伝子 / P19遺伝子 / P16遺伝子 / P73遺伝子 / caspase 3 / P15遺伝子 / 癌抑制遺伝子 / 疫学

研究概要

今年度の神経芽腫(NB)の検討では、9p領域では、これまで検討してきたp16遺伝子と読み枠のずれたp19^<ARF>遺伝子について検索し、本邦の細胞株17株中2株(12%)にp19の発現の減弱とp16の発現の消失と減弱を、本邦の新鮮腫瘍31例中5例(16%)に発現の異常を認めた。うちp16とp19がともに発現が消失していたものは2例、p19^<ARF>のみ消失は2例、p16のみ消失は1例であった。18q領域では、17領域でLOHを検討し、82例中18例(22%)でLOHがみられた。このうちD18S363とD18S858およびDS18S52とD18S36で共通欠失がみられ、前領域はDCC遺伝子を含んでいたが、Smad2とSmad4は含んでいなかった。この欠失とNBの臨床像との相関はみられなかった。この領域には未知の癌抑制遺伝子の存在が示唆された。1p36領域のp73遺伝子の検討では、NB細胞株22株中3株で発現異常が認められた。新鮮腫瘍30例中14例で発現異常が認められ、本邦でのp73遺伝子の発現異常の頻度は進展例の方が早期例より、また臨床発症例の方がマスクリーニングで発見された例よりも有意に高かった。米国でも同様の検討を行い、進展例で高頻度にみられた。今後マレーシアと韓国の症例でも行う予定である。FISH法で検索した全ての細胞株で、p73遺伝子の片方のアリルの欠失が認められ、LOHは33例中5例(15%)に認められた。(RT)-PCR-SSCPによる変異の検討では、細胞株と新鮮腫瘍のいずれにおいても変異はみられず、サザン法でもホモ欠失と再構成は認められず、p73はNBの発症よりも進展に関与していると思われた。lp36のコスミドよりBACを単離し、BACコンティグを作成し、ホモ欠失のあるNBの細胞株をみいだし、この近傍よりcaspase3の下流にあるDFF45遺伝子のマウスのヒトホモログを単離し、検討を始めた。

研究成果

• [文献書誌] Yang HW. et al.: "Development of a polyclonal antibody with defined specificity against synthetic peptides from the N-myc oncoprotein using multiple antigen peptide and hemocyanin conjugation methods"J Pediatr Surg. 34. 454-460 (1999)
• [文献書誌] Yang HW. et al.: "Pattern of FHIT gene expression in normal and leukaemic cells"Int J Cancer. 81. 897-901 (1999)
• [文献書誌] Kodera T. et al.: "Microsatellite instability in lymphoid leukemia and lymphoma cell lines but not in myeloid leukemia cell lines"Genes Chromosomes Cancer. 26. 267-269 (1999)
• [文献書誌] Tanaka K. et al.: "Frequent allelic loss of the RB, D13S319 and D13S25 locus in myeloid malignancies with deletion/translocation at 13q14 of chromosome 13, but not in lymphoid malignancies"Leukemia. 13. 1367-1373 (1999)
• [文献書誌] Taki T. et al.: "AF17q25, a putative septin family gene, fuses the MLL gene in acute myeloid leukemia with t(11;17)(q23;q25)"Cancer Res. 59. 4261-4265 (1999)
• [文献書誌] Taki T. et al.: "AF5q31, a newly identified AF4-related gene, is fused to MLL in infant acute lymphoblastic leukemia with ins (5;11)(q31;q13q23) [In Process Citation]"Proc. Natil. Acad. Sci. USA. 96. 14535-14540 (1999)
• [文献書誌] Kitabayashi I.et al.: "The AML1-MTG8 leukemic fusion prorein forms a complex with a novel member of the MTG8(ETO/CDR) family,MTGR1." Mol Cell Biol. 18. 846-858 (1998)
• [文献書誌] Taki T.et al.: "ABI-1,a human homolog to mouse ab1-interactor 1,fuses the MLL gene in acute myeloid leukemia with t(10;11)." Blood. 92. 1125-1130 (1998)
• [文献書誌] Yamamoto K.et al.: "Spontaneous regression of localized neuroblastoma detected by mass screening." J Clin Oncol. 16. 1265-1269 (1998)
• [文献書誌] Gamou T.et al.: "The partner gene of AML1 in t(16;21) myeloid malignancies is a novel member of the MTG8(ETO) family." Blood. 91. 4028-4037 (1998)
• [文献書誌] Miyagawa K.et al.: "Loss of WT1 function leads to ectopic myogenesis in Wilms' tumour." Nature Genet. 18. 15-17 (1998)
• [文献書誌] Takita J.et al.: "The p16(CDKN2A) gene is involved in the growth of neuroblastoma cells and its expression is associated with prognosis of neuroblastoma patients." Oncogene.17. 3137-3143 (1998)