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Q熱リケッチアの感染防禦抗原の分子構築

研究課題

研究課題/領域番号 10460140
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用獣医学
研究機関岐阜大学

研究代表者

平井 克哉  岐阜大学, 農学部, 教授 (30021702)

研究分担者 増澤 俊幸  静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10181645)
山口 剛士  岐阜大学, 農学部, 講師 (70210367)
福士 秀人  岐阜大学, 農学部, 助教授 (10156763)
研究期間 (年度) 1998 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
13,300千円 (直接経費: 13,300千円)
2000年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1999年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
1998年度: 7,700千円 (直接経費: 7,700千円)
キーワードQ熱 / Q熱の分子構築 / リケッチア / コクシエラ菌 / Q熱リケッチア / Coxiella burnetii / 感染防禦抗原 / Q熱の診断 / 病原性支配遺伝子
研究概要

Q熱リケッチアの抗原性を担う蛋白質支配遺伝子は、熱ショックおよび27kDa外膜蛋白質支配の2種遺伝子(htpBおよびcomI)が知られているに過ぎない。今回は5つの新しい抗原性を担う53、50、47、34、27および24KDa蛋白質支配遺伝子をクローニングし、各遺伝子および発現蛋白質の性状を解析した。
sucB遺伝子は、405個のアミノ酸をコードする1,212bpのORFからなり、E.coliおよびH.influenzae ODHと、それぞれ54.3および54%の相同性を示したが、N-末端側のアミノ酸配列はそれぞれ45.5および42%の相同性を示した。発現蛋白質はマウス感染回復血清、ウサギ免疫血清およびQ熱患者血清と反応した。
icd遺伝子は、427個のアミノ酸からなる46.6kDaの蛋白質をコードするORFが同定され、E.coliおよびS.entericaのIDHと、それぞれ74および73%の高い相同性を示した。本遺伝子形質転換E.coli DEK2004におけるIDH産生はpH5から5.5の間で高く、本菌の増殖環境と関連すると考えられた。
24kDa外膜蛋白質支配遺伝子は630bpのORFからなり、この発現蛋白質はC.burnetii免疫血清と特異的に反応した。
53kDa糖蛋白質支配遺伝子は1,410bpのORFからなり、この発現蛋白質はC.burnetii免疫血清と特異的に反応した。この53kDa蛋白質はproteinase K処理により消化されず、本菌表面に存在する糖蛋白質であることが証明された。
34KDa蛋白質発現遺伝子のORFは915bpで305アミノ酸をコードし、シグナルペプチダーゼによって認識されたことから、菌体膜に関わることが示された。
これら発現蛋白質を精製後、モルモットに接種し感染防御能(ワクチン)を検討した結果、5つの各蛋白質は感染防御が成立しなかった。今後はその他のクローニング遺伝子からの発現蛋白を含め、各発現蛋白質の混合物による感染防御能の実験が必要である。

報告書

(4件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 1998 実績報告書
  • 研究成果

    (94件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (94件)

  • [文献書誌] Zhang,G.Q.: "Clinical evaluation of new polymerase chain reaction assay for detection of Coxiella burnetii in human serum samples."J.Clin.Microbiol.. 36. 77-80 (1998)

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  • [文献書誌] To,H.: "Antigenic characteristics of polypeptides of Coxiella burnetii isolates"Microbiol.Immunol.. 42. 81-85 (1998)

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  • [文献書誌] To,H.: "Coxiellosis in domestic and wild birds from Japan."J.Wildlife Dis.. 34. 310-316 (1998)

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  • [文献書誌] Zhang,G.: "Evaluation of a recombinant 27-kDa outer membrane protein of Coxiella burnetii as an immunodiagnostic reagent."Microbiol.Immunol.. 42. 423-428 (1998)

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  • [文献書誌] Zhang,G.Q.: "Direct identification of Coxiella burneti plasmids in human sera by nested polymerase chain reaction."J.Clin.Microbiol.. 36. 2210-2213 (1998)

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  • [文献書誌] To H.: "Prevalence of Coxiella burnetii infection in dairy cattle with reproductive disorders."J.Vet.Med.Sci.. 60. 859-861 (1998)

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  • [文献書誌] 山添文: "髄膜炎を伴うQ熱の1例"日本小児科学会雑誌. 103. 341-342 (1999)

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  • [文献書誌] Sawaishi,Y.: "Acute gerebellitis caused by Coxiella burnetii."Ann.Neurol.. 45. 124-127 (1999)

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  • [文献書誌] Kawahara,K.: "Comparison of Ehrlichia muris strain isolated from wild mice and ticks, and serologic evidence of humans and animals with E.muris as antigen."J.Clin.Microbiol.. 37. 1123-129 (1999)

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  • [文献書誌] To H.: "Sequence comparison of the variable VP2 region of infectious bursal disease virus isolates from Vietnam."J.Vet.Med.Sci.. 61. 429-432 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen,Sa V.: "Molecular cloning of an immunogenic and acid-unduced isocitrate dehydrogenase gene from Coxiella burnetii."FEMS Microbiol.Lett.. 175. 101-106 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen,Sa V.: "Characterization of the Coxiella burnetii suc B gene encoding an immunogenic dihydrolopoamide succinyltransferase."Microbiol.Immunol.. 43. 743-749 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen,Sa V.: "Differentiation of Coxiella burnetii isolates by sequence determination and PCR-restriction fragment length polumorphism analysis of isocitrate dehydrogenese gene."FEMS Microbiol.Lett.. 180. 243-254 (1999)

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  • [文献書誌] 高橋洋,: "Q熱、目で見る感染症"化学療法の領域. 15. 5-8 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "Q熱に関する最近の知見"日本獣医師会雑誌. 52. 77-83 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "ペットを介する病気"獣医畜産新報. 52. 915-919 (1999)

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  • [文献書誌] 小川基彦,: "発疹チフスの起因菌Rickettsia prowazekiiの全塩基配列決定-病原体および共生体としての童義-"蛋白質・核酸・酵素. 45. 1371-1376 (2000)

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  • [文献書誌] Zhang,G.Q.…Hirai,K.: "Molecular cloning and sequence analysis of A novel Coxiella burnetii gene encoding An 24 kDa outer membrane protein."Microbiol.Immunol.. (in press). (2001)

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  • [文献書誌] Takahashi,H.…Hirai,K.: "Prevalence of respiratory infection associated with Q fever in Japan : a sporadic disease among urban population transmitted from domesticated cats and dogs."Lancet. (in press). (2001)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "リケッチアによる感染症獣医感染症カラーアトラス、見上彪,丸山務監修"文永堂 東京. 397-409 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "リケッチアおよびクラミジア性ズーノーシス獣医公衆衛生学(第2版)、小川益男,金城俊夫,丸山務 編"95-99 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "リケッチア最新獣医診療ハンドブック 長谷川篤彦 編"(株)インターズー. 449-453 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "Q熱、知っておきたい現代感染症事情 中山宏明,多田功,南嶋洋一 編"医歯薬出版株式会社. 112-125 (1999)

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  • [文献書誌] Zhang, G.Q., To, H., Nguyen, Sa V., Ogawa, M., Hotta, A., Ymaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Clinical evaluation of a new PCR assay for detection of Coxiella burnetii in human serum samples."J.Clin.Microbiol.. 36. 77-80 (1998)

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  • [文献書誌] To, H., Hotta, A., Zhang, G.Q., Nguyen, Sa V., Ogawa, M., Amano, K., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Antigenic characteristics of polypeptides of Coxiella burnetii isolates."Mircrobiol.Immunol.. 42. 81-85 (1998)

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  • [文献書誌] To, H., Sakai, R., Shirota, K., Kano, C., Abe, S., Sugimoto, T., Takehara, K., Morita, C., Takashima, K., Maruyama, T., Yamaguchi, T., Fukushi, H., and Hirai, K.: "Coxiellosis in domestic and wild birds from Japan."J.Wildlife Dis.. 34. 310-316 (1998)

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  • [文献書誌] Zhang, G.Q., To, H., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Evaluation of a recombinant 27-kDa outer membrane protein of Coxiella burneti as an immunodiagnostic reagent."Microbiol.Immunol.. 42. 423-428 (1998)

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  • [文献書誌] Zhang, G.Q., To, H., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Direct identification of Coxiella burneti plasmids in human sera by nested PCR."J.Clin.Microbiol.. 36. 2210-2213 (1998)

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  • [文献書誌] Hirai, K.and To, H.: "Advances in the understanding of Coxiella burnetii infection in Japan."J.Vet.Med.Sci.. 60. 781-790 (1998)

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  • [文献書誌] To H., Htwe, K.K., Kako, N., Kim, H.S., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Prevalence of Coxiella burnetii infection in dairy cattle with reproductive disorders."J.Vet.Med.Sci.. 60. 859-861 (1998)

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  • [文献書誌] Sawaishi, Y., Takashima, I., Hirayama, Y., Abe, T., Mizutani, M., Hirai, K.and Takada, G.: "Acute cerebellitis caused by Coxiella burnetii."Ann.Neurol.. 45. 124-127 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen, Sa V., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Morecular cloning of an immunogenic and acid-induced isocitrate dehydrogenase gene from Coxiella burnetii."FEMS Microbiol.Lett.. 175. 101-106 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen, Sa V., To, H., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Characterization of the Coxiella burnetii suc B gene encoding an immunogenic dihydrolopoanide succinyltransferase."Microbiol.Immunol.. 43. 743-749 (1999)

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  • [文献書誌] Nguyen, Sa V.and Hirai, K.: "Differentiation of Coxiella burnetii isolates by sequence determination and PCR-restriction fragment length polymorphism analysis of isocitrate dehydrogenase gene."FEMS Microbiol.Lett.. 180. 249-254 (1999)

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  • [文献書誌] Quan, Y., To Ho., Zhang, G.Q.and Hirai, K.: "Cloning and expression of the 34kDa outer membrane protein gene of Coxiella burnetii."J.Vet.Med.Sci.. (in press). (2001)

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  • [文献書誌] Quan, Y., Zhang, G.Q., Fukushi, H., Yamaguchi, T.and Hirai, K.: "Identification of a new group in Coxiella burnetii isolates from China based on the com1 gene sequence."Microbiol.Immunol.. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Zhang, G.Q., To Ho. and Hirai, K.: "Molecular cloning and sequence analysis of A novel Coxiella burnetii gene encoding An 24 kDa outer membrane protein."Microbiol.Immunol.. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Zhang, G.Q., Hotta, A., Quan, Y., Yamaguchi, T., Fukushi, H.and Hirai, K.: "Molecular cloning and sequence analysis of A novel Coxiella burnetii gene encoding An immunoreactive, membrane associated 53 kDa glycoprotein."Microbiol.Immunol.. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takahashi, H., Goto, I., Hirai, K., Nukiwa, T.and Watanabe, A.: "Prevalence of respiratory infection associated with Q fever in Japan : a sporadic disease among urban population transmitted from domesticated cats and dogs."Lancet. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Zhang,G.Q.: "Clinical evaluation of new polymerase chain reaction assay for detection of Coxiella burnetii in human serum samples."J.Clin.Microbiol.. 36. 77-80 (1998)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] To,H.: "Antigenic characteristics of polypeptides of Coxiella burnetii isolates."Microbiol.Immunol.. 42. 81-85 (1998)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] To,H.: "Coxiellosis in domestic and wild birds from Japan."J.Wildlife Dis.. 34. 310-316 (1998)

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  • [文献書誌] Zhang,G.: "Evaluation of a recombinant 27-kDa outer membrane protein of Coxiella burnetii as an immunodiagnostic reagent."Microbiol.Immunol.. 42. 423-428 (1998)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Zhang,G.Q.: "Direct identification of Coxiella burneti plasmids in human sera by nested polymerase chain reaction."J.Clin.Microbiol.. 36. 2210-2213 (1998)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] To H.: "Prevalence of Coxiella burnetii infection in dairy cattle with reproductive disorders."J.Vet.Med.Sci.. 60. 859-861 (1998)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Nguyen,Sa V.: "Differentiation of Coxiella burnetii isolates by sequence determination and PCR-restriction fragment length polumorphism analysis of isocitrate dehydrogenese gene."FEMS Microbiol.Lett.. 180. 243-254 (1999)

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  • [文献書誌] 平井克哉: "ベットを介する病気"獣医畜産新報. 52. 915-919 (1999)

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  • [文献書誌] 小川基彦、: "発疹チフスの起因菌Rickettsia prowazekiiの全塩基配列決定-病原体および共生体としての意義-"蛋白質・核酸・酵素. 45. 1371-1376 (2000)

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  • [文献書誌] Nguyen, Sa V.: "Characterization of the Coxiella burnetii suc B gene encoding an immunogenic dihydrolopoamide succinyltransferase."Microbiol. Immunol.. 43. 743-749 (1999)

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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