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臓器細胞への遺伝子直接導入法による細胞極性形成機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 10470003
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 解剖学一般(含組織学・発生学)
研究機関群馬大学

研究代表者

高田 邦昭  群馬大学, 医学部, 教授 (20129290)

研究分担者 鈴木 健史  群馬大学, 医学部, 助手 (00261868)
鈴木 雅一  群馬大学, 生体調節研究所, 助手 (60280913)
研究期間 (年度) 1998 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
12,700千円 (直接経費: 12,700千円)
2001年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
2000年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
1999年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1998年度: 5,400千円 (直接経費: 5,400千円)
キーワード肝臓 / 膵臓 / エレクトロポレーション / 糖輸送体 / 免疫電顕法 / 分泌顆粒 / 細胞極性 / GLUT / 細胞膜 / GFP / 遺伝子導入 / 糖輸送体位 / 頂部細胞膜 / 基底側壁部細胞膜 / 臓器細胞 / 遺伝子直接導入法 / リポフェクション法 / ラット / 電気パルス
研究概要

肝臓とは異なる細胞内輸送系を持つと考えられている膵臓を用いて、膜蛋白質である糖輸送体GLUTの局在を検討した。膵臓は、肝臓に比べてエレクトロポレーション時の組織へのダメージが大きいので、導入の条件をGFPゴンストラクトの導入をモデル系としてさらに改良した。糖輸送体のなかでも、GLUT4は細胞内の核上部の細胞質にひろく分布した。微分干渉像と比較すると、チモーゲン顆粒のある部位に相当し、顆粒膜へのターゲッティングが示唆された。アミラーゼ等との蛍光多重染色を試みたが、断定的な結果は得られなかった。そこで、ポストエンベッディング酵素抗体免疫電顕法を用いてオルガネラレベルで観察し、分泌顆粒にあるのを示した。即ち、生体内で調節性分泌をおこなう高度に分化した外分泌細胞にGLUT4を発現させると分泌顆粒膜に保持されるのが明らかになった。こは心臓のANP分泌細胞で、GLUT4が顆粒膜へターゲティングされるのと類似の機構が働くためと推定された。これは、GLUT4の細胞内局在が、一般的に調節性分泌経路へのターゲティングによるであろうことを示唆している。さらに糖輸送体よりは構造の簡単な膜蛋白である水チャネル(アクアポリン)についても、生体エレクトロポレーション法により、ラット肝臓、膵臓へ導入してその局在を検討中である。

報告書

(5件)
  • 2001 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2000 実績報告書
  • 1999 実績報告書
  • 1998 実績報告書
  • 研究成果

    (28件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (28件)

  • [文献書誌] Shinoda Y: "Expression of sugar Trasporters by in vivo electroporation and particle gun method in the rat liver: localization to specific membrane domains"Acta Histochem Cytochem. 34. 15-24 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanno T: "NMDA-receptor-dependent and -independent cytotoxic effect of D. discoideum differentiation-inducing factor on rat cortical neurons"Develop Growth Differ. 43. 709-716 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takata K: "Glucose transporters-----Localization to specific membrane domains"電子顕微鏡. 36. 23-25 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 高田邦昭: "組織細胞化学2001(日本組織細胞化学会編)"学際企画. 8 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki T: "Direct gene transfer into rat liver cells by in vivo electroporation"FEBS Lett.. 425. 436-440 (1998)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sugawara-Yokoo M: "Presence of fructose transporter GLUT5 in the S3 proximal tubules in the rat"Kidney Int. 56. 1022-1028 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takata K: "Sugar transporters in polarized epithelial cells"Acta Histochem Cytochem. 32. 53-58 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Matsuzaki T: "An anti-peptide antibody that recognized unexpected protein - A case report"Acta Histochem Cytochem. 33. 361-365 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki T: "Polarized distribution of Na+-dependent glucose cotransporter SGLT1 in epithelial cells"Acta Histochem Cytochem. 33. 159-162 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kanno T: "NMDA-receptor-dependent and -independent cytotoxic effect of D. discoideum differentiation-inducing factor on rat cortical neurons"Develop Growth Differ. 43. 709-716 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shinoda Y: "Expression of sugar transporters by in vivo electroporation and particle gun methods in the rat liver : Localization to specific membrane domains"Acta Histochem Cytochem. 34. 15-24 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Suzuki T: "The apical localization of SG1t1 glucose transporter is determined by the short amino acid sequence in its N-terminal domain"Eur J Cell Biol. 80. 765-774 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shinoda Y, Suzuki T, Sugawara-Yokoo M, Nagamatsu S, Kuwano H, Takata K.: "Expression of sugar transporters by in vivo electrotion and particle gun methods in the rat liver : Localization to specific membrane domains"Acta Histochem Cytochem. 34. 15-24 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Kanno T.: "NMDA-receptor-dependent and -independent cytotoxic effect of D.discoideum differentlation-inducing factor on rat cortical neurons"Develop Growth Differ. 43. 709-716 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Takata K.: "Glucose transporters-Localization to specific membrane domains"電子顕微鏡. 36. 23-25 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 高田邦昭: "組織細胞化学2001 (日本組織細胞化学会編)"学際企画. 8 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Omata W: "Actin filaments play a critical role in insulin-induced exocytotic recruitment but not in endocytosis of GLUT4 in isolated rat adipocytes."Biochem J. 346. 321-328 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Sugawara-Yokoo M: "Differential localization of organic cation transporters rOCT1 and rOCT2 in the basolateral membrane of rat kidney tubules."Histochem Cell Biol. 114. 175-180 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Matsuzaki T: "An anti-peptide antibody that recognized unexpected protein-A case report."Acta Histochem Cytochem. 33. 361-365 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 高田邦昭: "遺伝子工学を用いた形質膜の機能解析"組織培養工学. 26. 170-171 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Ogihara T: "Peptide transporter (PepT1) in the rat small intestine: ultrastructural localization and effect of starvation and administration of amino acids"Histochem J. 31. 169-174 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Sugawara-Yokoo M: "Presence of fructose transporter GLUT5 in the S3 proximal tubules in the rat"Kidney Int. 56. 1022-1028 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Takata K: "Sugar transporters in polarized epithelial cells"Acta Histochem Cytochem. 32. 53-58 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 高田邦明: "グルコース輸送体:その生理機能・病態と関連"Bio Clinica. 14(10). 893-898 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Suzuki T: "Direct gene transfer into rat liver cells by in vivo electroporation." FEBS Lett. 425. 436-440 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 高田邦昭: "糖輸送体と上皮細胞の極性." Mebio. 15(3). 129-131 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 高田邦昭: "上皮細胞における糖輸送機構." 解剖学雑誌. 73. 485-495 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Takata K: "Sugar transporters in polarized epithelial cells." Acta Histochem Cytochem. (in press).

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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