調圧伝達・脳虚血因子ドーパの証明及び同トランスポーター分子の同定・発現・機能解析

• 研究課題/領域番号: 10470026
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 薬理学一般
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 五嶋 良郎 (1999) 横浜市立大学, 医学部, 教授 (00153750); 三須 良實 (1998) 横浜市立大学, 医学部, 教授 (10025687)
• 研究分担者: 佐々木 幸生 横浜市立大学, 医学部, 助手 (10295511) ; 宮前 丈明 横浜市立大学, 医学部, 助手 (00239435) ; 古川 信也 横浜市立大学, 医学部, 助手 (90285114) ; 五嶋 良郎 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (00153750)
• 研究期間 (年度): 1998 – 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 13,000千円 (直接経費: 13,000千円); 1999年度: 4,100千円 (直接経費: 4,100千円); 1998年度: 8,900千円 (直接経費: 8,900千円)
• キーワード: L-ドーパ / 弧束核 / 圧受容体反射 / 線条体 / 虚血 / 神経細胞死 / トランスポーター / 海馬 / 圧受容器情報伝達物質ドーパ / 孤束核-尾側腹外側延髄ドーパ性投射 / 孤束核単離細胞 / 高電位活性化Ca^<2+>チャネル電流促進 / ドーパトランスポーター / 4血管閉塞脳虚血 / 神経細胞死因子ドーパ / 脳虚血グルタミン酸誘発上流因子内因性ドーパ

研究概要

[I]ラット弧速核系〔1〕圧受容器-大動脈減圧神経-弧速核-尾側腹外側延髄DOPA性圧受容情報伝達投射系 : (1)弧束核電気的破壊は、尾側・吻側腹外側延髄DOPA組織含量を減少した.(2)大動脈神経間歇刺激は同側尾側腹外側延髄微量透析間にDOPA遊離を反復一定して誘発した.(3)圧受容器刺激は同DOPA遊離を誘発し、この遊離は弧束核降圧部の急性電気的破壊により消失した.〔2〕弧束核単離細胞パッチクランプ,DOPA自体のhigh voltage activatec(HVA)Ca2+チャネル電流促進作用 : DOPA0.1-1mMはDOPA ME-感受性(1mM)に、HVA Ca2+チャネル電流を最大50%増大した.[II]脳虚血・遅発性神経細胞死因子DOPAの証明 : 内因性遊離DOPAは脳虚血グルタミン酸遊離-遅発性神経細胞死の上流因子である : 4血管閉塞脳虚血モデル線条体微量透析系において,(1)虚血はDA,グルタミン酸遊離の増大を伴って,DOPA遊離を増大した.線条体において軽度,海馬に中等度〜軽度の遅発性神経細胞死が生じた.(2)協力・比較的安定なDOPA競合的拮抗薬DOPA CHEの虚血前線条体内灌流は,用量依存性にグルタミン酸遊離を抑制(最大抑制80%),線条体遅発性神経細胞死を保護した.[III]DOPAトランスポータ系 : (1)種々の動物組織由来polyA+ RNAをアフリカツメガエル卵母細胞に注入,〔14C〕DOPAの取り込み活性を測定し,ウサギ小腸上皮が最も高い活性を示した.DOPA輸送部位は中性塩基アミノ酸輸送体の基質特異性を有し,適合するアミノ酸輸送系はb0,+系あるいはy+L系であった.(2)アンチセンスの結果はrBATが同DOPA取り込み活性の必須因子であることを示した.一方,ラット中枢におけるDOPA取り込み部位は視床下部正中隆起外側,同視索上核,弧束核,小脳バーグマングリア,海馬等に見られた.海馬における取り込みは50%程度Na+,CI--依存性画分を有していた。

研究成果

• [文献書誌] 三須良寛 古川信也 他: "内因性遊離DOPAは脳虚血-グルタミン酸遊離-神経細胞死の上流因子か?"日薬理誌. 112 補冊11. 93-97 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Miyamae T. et al.: "Some interactions of L-DOPA and its related compounds with glutamate receptors"Life Sci.. 64. 1045-1054 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nishiyama M. et al,: "An L-DOPA ergic relay from the posterior hypothalamic nucleus to the restral ventrolapteral medulla and its cardivascular function in anesthetized rats"Neurosience. 92. 123-135 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Miyamae T. et al.: "L-DOPA ergic components in the caudeal ventrolateral medulla in baroreflex neurotransmission"Neuroscience. 92. 137-149 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Honjo K. et al,: "GABA may function via GABAA receptors to inbibit hypotension and brady cardia by L-DOPA microinjected into depressor sipes of the nucleus tranctus solitari in anestherized rats"Neurosci Lett.. 261. 93-96 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Goshima Y. et al.: "The evidence fortonic GABA ergic regulation of basal L-DOPA rokase via activation of ingibitory GABAA receptors in the nucleus tractus solitarii of anesthetized rats"Neurosci Lett. 261. 155-** (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Furukawa N. et al.: "L-DOPA eyelohexeyl ester is a novel potent and relatively stabele comperitive antagonist against L-DOPA ameng several L-DOPA ester compounde"Jpn. J. Pharmacol. 82. 40-47 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishii H. et al.: "Invoivement of rBAT in Nat-dependent and-independent transport of the neurotransmitter candidatt L-DOPA in xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium poly A+RNA"
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Misu Y et al,: "Is endogenously released DOPA itself an upstream factor for increase in glutamate release and delayed neuronal cell death induced by transient ischemia in rats?"Folia Pharmacol. Jpn.. 112 Suppl1. 93-97 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Miyamae T et al,: "Some interactions of L-DOPA and its related compounds with glutamate receptors."Life Sci.. 64. 1045-1054 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nishihama M et al,: "An L-DOPA Aergic relay from the posterior hypothalamic nucleus to the rostral ventrolateral medulla and its cardiovascular function in anesthetized rats."Neuroscience. 92. 123-135 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Miyamae T et al,: "L-DOPA Aergic components in the caudal ventrolateral medulla in baroreflex neurotransmission."Neuroscience. 92. 137-149 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Honjo K et al,: "GABA may function via GABAA receptors to inhibit hypotension and bradycardia by L-DOPA microinjected into depressor sites of the nucleus tractus solitarii in anesthetized rats."Neurosci. Lett.. 261. 93-96 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Goshima Y et al,: "The evidence for tonic GABAergic regulation of basal L-DOPA release via activation of inhibitory GABAA receptors in the nucleus tractus solitarii of anesthetized rats."Neurosci. Lett.. 261. 155-158 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Furukawa N et al,: "L-DOPA cyclohexyl ester is a novel potent and relatively stable competitive antagonist against L-DOPA among several L-DOPA ester compounds."Jpn. J. Pharmacol.. 82. 40-47 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishii H et al,: "Involvement of rBAT in Na+-dependent and -independent transport of the neuro transmitter candidate L-DOPA in Xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium polyA+RNA."Biochim. Biophys.. Acta 000. 000
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] 三須良實 古川信也 等: "内因性遊離DOPAは脳虚血-グルタミン酸遊離-神経細胞死の上流因子か?"日薬理誌. 112補冊1. 93-97 (1998)
• [文献書誌] Miyamae T.Goshima Y et al.: "Some interactions of L-DOPA and its related compounds with glutamate receptors"Life Sci. 64. 1045-1054 (1999)
• [文献書誌] Nishiyama M.Miyamae T et al.: "An L-DOPA ergic relay from the posterior hypothalamic nucleu's to the rostral ventrolateral medulla and its cardiovascular function in anesthetizrats."Neuroscience. 92. 123-135 (1999)
• [文献書誌] Miyamae T.Goshima Y et al.: "L-DOPAergic components in the caudal ventrolateral medulla in baroreflex neurotransmission."Neurosience. 92. 137-149 (1999)
• [文献書誌] Honjo K.Goshima Y et al.: "GABA may funotion via GABAA receptors to inhibit hypotension and bradycardia by L-DOPA microinjected into depressor sites of the nucleus tratus solitarii in anesthetized rats."Neurosci.Lett.. 261. 93-96 (1999)
• [文献書誌] Goshima Y.Honjo K et al.: "The evidence for tonic GABA ergic regulation of basal L-DOPA release viaactivation of inhibitory GABAA recepters in the nucleas tractus sclitarii of anesthetized rats."Neurosci.Lett.. 261. 155-158 (1999)
• [文献書誌] Furukawa N,Goshima Y et al.: "L-DOPA cyclohexyl ester is a ncvel potent and relatively stable cometitive antagonist against L-DOPA among Several L-DOPA ester compounds."Jpn.J.Pharmacol. 82. 40-47 (2000)
• [文献書誌] Ishii H,Sasaki Y et al.: "Invclvement of rBAT in Na+-dependent and -independent transpcrts of the nearotransmitter candidate L-DOPA in Xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium polyA+RNA."Biochim.Biophys.Acta. (2000)
• [文献書誌] 古川信也、新井信隆、三須良實: "ドーパはグルタミン酸遊離-神経細胞死の上流因子か、「ニューロン死を標的とした神経疾患治療薬」" 医学のあゆみ. 186. 791-795 (1998)
• [文献書誌] Miyamae T.Misu Y et al.: "Some interactions of L-DOPA and its related compounds with Blutamate receptors." Life Sci. 64. 1045-1054 (1999)
• [文献書誌] Hiyamae T.Misu Y et al.: "L-DOPAergic components in the caudal ventrolateral medulla paroreflex neurotransmission of rats" Neuroscience. 00. 000-000 (1999)
• [文献書誌] Nishihama M.Misu Y et al.: "An L-DOPAergic relay from the posterior hypothalamic nucleus to the rostral ventrolateral medulla and its cardiovascular furctions in onesthetized rats." Neuroscience. 00. 000-000 (1999)
• [文献書誌] Goshima Y.Misu Y et al.: "The evidence for tonic GABAergic regulation of basal L-DOPA release via activation of inhibitory 6ABA_A receptors in the necleus tractus solitari of aresthetized rats." Neurosci Lett. 00. 000-000 (1999)
• [文献書誌] Honjo K、Misu Y et al.: "6ABA may function tonically via 6ABA_A receptors to inhibit hypotensjon and bradycardia by L-DOPA microinieted into depressor sites of the nuclens tractus solitarii in anesthetized rats." Neurosci Lett. 00. 000-000 (1999)
• [文献書誌] 新井信隆、古川信也、三須良實: "ドーパはグルタミン酸遊離-神経細胞死の上流因子か-ドーパ新競合的拮抗薬の保護作用-別冊・医学のあゆみ「神経細胞死制御」三須良實、赤池昭紀編、134-138" 医学のあゆみ, 260 (1998)