| 研究課題/領域番号 |
10470035
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医化学一般
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| 研究機関 | 札幌医科大学 |
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研究代表者 |
加納 英雄 札幌医科大学, 医学部, 教授 (70045475)
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| 研究分担者 |
今井 伸一 札幌医科大学, 医学部, 助手 (20213209)
甲斐 正広 札幌医科大学, 医学部, 助手 (80260777)
和田 郁夫 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (40182969)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
11,100千円 (直接経費: 11,100千円)
1999年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1998年度: 9,000千円 (直接経費: 9,000千円)
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| キーワード | ホスファチジン酸ホスファターゼ / ジアシルグリセロールキナーゼ / リン脂質 / シグナル伝達 / 遺伝子ターゲッティング |
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| 研究概要 |
本研究では、ジアシルグリセロールキナーゼ(DGK)とホスファチジン酸ホスファターゼ(PAP)の二つの酵素を検討した。両者とも当研究室で最初に精製と分子クローニングを報告した酵素であり、脂質合成系に加えシグナル伝達系の制御にも関与している。我々は9種のDGKアイソザイム中、α,γ,δ型をクローン化命名した。また4種のヒトPAP中、2a,2b型を最初にクローン化命名している。
DGKについては、従来頻用されてきた酵素阻害剤(R59022など)が、I型(DGK-α,β,γ)の酵素に選択性を持つことを報告した。またDGK-δのC-末端に保存されているSAMドメインがER-局在化シグナルとして働くことが分かり、現在本酵素のゴルジ膜形成への関与を調べている。当研究室の坂根講師が米国ユタ大学プレスコット研において、各種DGSアイソザイムのKOマウス作製に成功して帰学しており、当研究室でもDGK KOマウス解析を続行する予定である。
PAPについては、PAP-2bを培養細胞に発現させ、本酵素が細胞膜に局在し、細胞外のLAPを分解するエクト型酵素であることを示した。PAP-2bは非カベオラ性のラフトに存在するが、機能的に関連するホスホリパーゼDの表面膜ミクロドメインにおける存在形態も併せ比較検討中である。PAP-2aKOマウス作製については、まだ成功していない。
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