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CCK-A受容体トランスジェニックラットの作製(OLETFラットへの導入)

研究課題

研究課題/領域番号 10470144
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 消化器内科学
研究機関産業医科大学

研究代表者

大槻 眞  産業医科大学, 医学部, 教授 (00030916)

研究分担者 木原 康之  産業医科大学, 医学部, 助手 (80279330)
中村 早人  産業医科大学, 医学部, 講師 (90207902)
研究期間 (年度) 1998 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
11,100千円 (直接経費: 11,100千円)
2000年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1999年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1998年度: 9,100千円 (直接経費: 9,100千円)
キーワードOLETFラット / トランスジェニック / CCK-A受容体 / ノックアウトラット
研究概要

平成10年度には、OLETFラットのCCK-A受容体は遺伝子レベルの異常であり、CCK-A受容体を介する機能は完全に消失していたことを確認して報告した。平成11年度には、CCK-A受容体全領域をコードするcDNAをRT-PCR法にて取り出すことに成功した。CCK-A受容体の発現をより強力にするため、SV40のエンハンサーおよびプロモーター領域をもち、同時に翻訳効率を増加させるためのポリ(A)領域をもつpSIプラスミドにCCK-A受容体cDNAを組み込んだ。
平成12年度は実際にマイクロインジェクション法を行った。OLETFラット交尾後、455個を採卵し、387個にDNAを注入し、342個の生存を確認して移植し、114匹の産子が得られ、110匹が離乳可能であった。テールから抽出したDNAをもちいてPCRを行ったところ、最終的に17匹のTgラットを得ることができた。産子あたりのTg率は14.91%であり、移植胚あたりのTg率は4.97%であり、注入胚あたりのTg率は4.39%であった。一般的にTgマウスと比較するとTgラットの作製は困難であるが、今回の実験では高率にTgラットを得ることができた。今後はこのTgラットを交配して、実際にCCK-A受容体の蛋白質が発現し、かつ機能しているラットを選別し、膵線維化機序の検討をおこなって行く予定である。

報告書

(4件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 1998 実績報告書
  • 研究成果

    (26件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (26件)

  • [文献書誌] Hayato Nakamura et al: "Defects of cholecystokinin (CCK)-A receptor gene expression and CCK-A receptor-mediated biological functions in Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) rats"J Gastroenterol. 33. 702-709 (1998)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 木原康之 ら: "OLETFラットにおける膵線維化機序の検討"OLETFラット研究会記録集. 4. 19-22 (1998)

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    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Alterations in pancreatic exocrine functions in OLETF rats."Elsevier Obesity and NIDDM Lessons from the OLETF rat. 171-181 (1999)

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    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "CCK and CCK-A receptors in the control of feeding behavior."Elsevier Control mechanisms of stress and emotion : Neuroendocrine-based studies. 141-154 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Metabolic abnormalities in the genetically obese and diabetic Otsuka Long-evans Tokushima Fatty Rat can be prevented and reserved by α-glucosidase inhibitor."Metabolism. 48. 347-354 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Troglitazone prevents and reverses dyslipidemia, insulin secretory defects, and histologic abnormalities in a rat model of naturally occurring obese diabetes"Metaborism. 49. 1167-1175 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Nakamura, Y.Kihara, M.Tashiro, K.Kanagawa, H.Shirohara, M.Yamamoto, H.Yoshikawa, K.Fukumitsu, Y.Hirohata, M.Otsuki: "Defects of cholecystokinin (CCK)-A receptor gene expression and CCK-A receptor-mediated biological functions in Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) rats."Journal of Gastroenterology. 33. 702-709 (1998)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Yamamoto, D.M.Jia, K.Fukumitsu, I.Imoto, Y.Kihara, Y.Hirohata, M.Otuski: "Metabolic abnormalities in the genetically obese and diabetic Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty Rat can be prevented and reserved by α-glucosidase inhibitor."Metabolism. 48(3). 347-354 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Otsuki, M.Yamamoto, T.Akiyama, Y.Kihara, H.Nakamura, I.Imoto: "Alterations in pancreatic exocrine functions in OLETF rats. Obesity and NIIDM : Lessons from the OLETF Rat"Editors : Kenji Shima Elsevier Science B.V.. 171-181 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Otsuki, M.Koide, H.Nakamura, Y.Kihara, Dong Mei Jia, I.Imoto, Y.Okabayashi: "CCK and CCK-A receptors in the control of feeding behavior. Control Mechanisms of Stress and Emotion : Neuroendocrine-Based Studies"Editors : H.Yamashita, John W.Funder, Joseph G.Verbalis, Y.Ueta, Y.Endo Elsevier Science B.V.. 141-154 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] D.M.Jia, A.Tabaru, H.Nakamura, K.Fukumitsu, T.Akiyama, M.Otsuki: "Troglitazone prevents and reverses dyslipidemia, insulin secretory defects, and histologic abnormalities in a rat model of naturally occurring obese diabetes."Metabolism. 49(9). 1167-1175 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] D.M.Jia, A.Tabaru, T.Akiyama, S.Abe, M.Otsuki: "Troglitazone prevents fatty changes of the liver in obese diabetic rats."Journal of Gastroenterology and Hepatology. 15(10). 1183-1191 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] D.M.Jia, K.Fukumitsu, A.Tabaru, T.Akiyama, M.Otsuki: "Troglitazone stimulates pancreatic growth in congenitally CCK-A receptor-deficient OLETF rats."American Journal of Physiology. (in press).

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    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hayato Nakamura et al: "Defects of cholecystokinin (CCK)-A receptor gene expression and CCK-A receptor-mediated biological functions in Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty (OLETF) rats"J Gastroenterol. 33. 702-709 (1998)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 木原康之 ら: "OLETFラットにおける膵線維化機序の検討"OLETFラット研究会記録集. 4. 19-22 (1998)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Alterations in pancreatic exocrine functions in OLETF rats."Elsevier Obesity and NIDDM Lessons from the OLETF rat. 171-181 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "CCK and CCK-A receptors in the control of feeding behavior."Elsevier Control mechanisms of stress and emotion : Neuroendocrine-based studies. 141-154 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Metabolic abnormalities in the genetically obese and diabetic Otsuka Long-evans Tokushima Fatty Rat can be prevented and reserved by α-glucosidase inhibitor."Metabolism. 48. 347-354 (1999)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Troglitazone prevents and reverses dyslipidemia, insulin secretory defects, and histologic abnormalities in a rat model of naturally occurring obese diabetes"Metaborism. 49. 1167-1175 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Hayato Nakamura et al: "Defects of cholecystokinin(CCK)-A receptor gene expression and CCK-A receptor-mediated biological functions in Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)rats"J Gastroenterol. 33. 702-709 (1998)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 木原康之ら: "OLETFラットにおける膵線維化機序の検討"OLETFラット研究会記録集. 第4巻. 19-22 (1998)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Alterations in pancreatic exocrine functions in OLETF rats."Elsevier Obesity and NIDDM Lessons the OLETF rat. 171-181 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "CCK and CCK-A receptors in the control of feeding behavior."Elsevier Control mechanisms of stress and emotion:Neuroendocrine-based studies. 141-154 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Makoto Otsuki et al.: "Metabolic abnormalities in the genetically obese and diabetic Otsuka Long-evans Tokushima Fatty Rat can be prevented and reserved by α-glucosidase inhibitor."Metaborism. 48(3). 347-354 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Hayato Nakamura et al: "Defects of cholecystokinin(CCK)-A receptor gene expression and CCK-A receptor-mediated biological functions in Otsuka Long-Evans Tokushima fatty(OLETF)rats" J Gastroenterol. 33. 702-709 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] 木原康之ら: "OLETFラットにおける膵線維化機序の検討" OLETFラット研究会記録集. 第4巻. 19-22 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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