| 研究概要 |
1)in vivoにおいて,AGT(アンジオテンシノーゲン)遺伝子の allele による mRNA 発現量の差を検討した.
ヒト臓器として心臓および肝臓を検討した.心臓組織は冠動脈バイパス形成術時,得られる右心耳組織を,肝臓組織は肝臓疾患診断を目的とした肝生検時の検査済み検体の残りを使用した.検体からtotal RNAを抽出後,RT-PCR法により M235T多型領域のDNA断片を得た.これをテンプレートとし,塩基置換部分を境にして,コモンプライマーおよび長さの異なるallele特異的プライマーと Taq DNA ligaseを使って解析した.その結果,心臓組織64例のうち,M235T多型のヘテロは11例あり,それぞれの235T alleleと235M alleleの発現比を測定したところ,1.00〜1.23といずれの検体でも235T alleleの発現が多かった.さらにSSCP法を応用し,発現量を定量する方法で確認をおこなった.235T alleleからの発現量が多いことが,TT遺伝子型を持つヒトの高血圧易羅患性の原因となっていることが示唆された.肝臓組織に関しては10例の検体で解析したが,ヘテロは1例のみであり,意味のある結果は現時点では導き出せなかった.
2)AGTコピー数の異なるマウスにおいて,塩分摂取などの環境要因とAGTコピー数の違いによる遺伝要因との交互作用を検討する.
マウスはAGTコピー数が1,2,3,4のオスを数匹ずつ,塩分摂取の多いグループと通常食に分けた.血圧は,tail-cuff method測定した.マウスの開発者が報告しているように,AGTコピー数により,血圧の平均が上昇する事を確認した.しかし,塩分摂取による,血圧の有意な差異はいずれのコピー数の群でもみられなかった.原因として血圧測定自体が不安定であること,この実験に使用したマウスでは塩分感受性が低いこと等が考えられる.
|
