| 研究課題/領域番号 |
10480204
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
細胞生物学
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| 研究機関 | (財)東京都医学研究機構 |
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研究代表者 |
芝崎 太 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (90300954)
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| 研究分担者 |
吉澤 利弘 筑波大学, 臨床医学系・神経内科, 講師 (50212311)
近藤 英作 岡山大学, 第一生理学講座, 助手 (30252951)
大森 信彦 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (80311421)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
11,800千円 (直接経費: 11,800千円)
1999年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
1998年度: 8,800千円 (直接経費: 8,800千円)
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| キーワード | カルシニューリン / 神経系 / 免疫系 / アポトーシス / 転写因子 / リン酸化 / 虚血 / Bcl-2 / NF-AT / 細胞死 / Transgenic / glia |
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| 研究概要 |
serine/threnine脱リン酸化酵素であるカルシリューリンはT細胞活性化に重要な酵素であることが判明している。我々は本研究の中で、この酵素の標的である転写因子NFATについてその詳しい分子内制御機構について解析し、リン酸化部位を含めた機能解析に加え、NFATの特異的なキナーゼ(NFATキナーゼ)としてCKIおよびPKCを同定した。免疫細胞に特異的な転写因子として知られていたNFATであるが、他の臓器にもそのサブタイプが発現していることが判明し、心筋細胞ではカルシニューリン/NFATを介する情報伝達系が心筋肥大に関与すること、および神経細胞やグリア細胞にも発現し、その役割が改めて注目されるようになった。
一方、カルシニューリンは活性依存的にアポトーシスを起こすことを依然報告したが、実はBcl-2 familymemberの1つであるBadの脱リン酸化を介してアポトーシスを誘導することが判明した。我々はこの経路が神経疾患で実際に働いているかどうかを調べるために、ラットの前脳虚血モデルを用いて検討した。虚血一週間後には海馬のCA1領域が特異的に障害されるが、このときCA1領域のみにBadの脱リン酸化およびミトコンドリアからのチトクロームc流出が認められ、CsAとFK506の前処置により完全に脱リン酸化が阻止された。さらに動物用のMRIを用いて詳しい解析を行った結果、CsAは完全に虚血性神経細胞死を抑えるにも関わらず、FK506は40-50%の抑制しかなく単なるカルシニューリンの抑制だけでは説明できないことが判明した。その後、詳細な解析により、細胞死に大きな役割を演じているミトコンドリアに発現するシクロフイリンDがCsAにより抑制され細胞死が効果的に阻止されているらしいことがわかってきた。また、カルシニューリンはBadのみならずBcl-2自体も脱リン酸化することが判明し、リン酸化部位特異的な抗体作成により、Bcl-2リン酸化は乳癌やB細胞リンパ腫において認められた。現在Bcl-2キナーゼを同定しており、カルシニューリンとの相互作用を含めた詳しい解析を今後とも行う予定である。
以上、カルシニューリンの多様な作用を2年間の本研究において解析し、多くの新たな知見を得られたと確信する。
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