細胞増殖とシグナル伝達による中間径フィラメント制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 10480205
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 細胞生物学
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 稲垣 昌樹 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 部長 (30183007)
• 研究分担者: 伊奈田 宏康 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 研究員 (90283522) ; 永田 浩一 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 室長 (50252143)
• 研究期間 (年度): 1998 – 2000
• 研究課題ステータス: 完了 (2000年度)
• 配分額: 10,300千円 (直接経費: 10,300千円); 2000年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円); 1999年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 1998年度: 4,800千円 (直接経費: 4,800千円)
• キーワード: 中間径フィラメント(IF) / IF総合蛋白質 / Rhoキナーゼ / 細胞質分裂 / 抗リン酸化ペプチド抗体 / 中間径フィラメント / CaMキナーゼII / Rho-キナーゼ / ケラチン結合蛋白質 / 中間径フィラメント構築制御 / 細胞周期 / 中間径フィラメント(1F)蛋白質 / リン酸化反応 / リン酸化ペプチド抗体 / Rho

研究概要

本研究において申請者らは、1)抗リン酸化ペプチド抗体群を用いることで細胞質分裂溝の近傍に活性化Rhoキナーゼが集積し、中間径フィラメント蛋白質をリン酸化することを明らかにした。2)また、このRhoキナーゼによるフィラメント蛋白質のリン酸化部位にリン酸化をうけないような変異を導入した中間径フィラメント蛋白質によって構築されたフィラメントは、細胞質分裂が終了しているにもかかわらず、フィラメントの断裂・分配が生じていないことを明らかにした。3)Two hybrid法を用いて、新規中間径フィラメント総合蛋白質を数多く見出した。それらのうちMrj(Hsp40のファミリー蛋白質)の解析は進みMrjが単層上皮に特異的に発現するケラチン8/18中間径フィラメントを選択的にその構築を調節することを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Yasui,Y., et al.: "Roles of Rho-associated kinase in cytokinesis ; Mutations in Rho-associated kinase phosphorylation sites impair cytokinetic segregation of glial filaments."J.Cell Biol.. 143. 1249-1258 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kosako,H., et al.: "Specific accumulation of Rho-associated kinase at the cleavage furrow during cytokinesis ; Cleavage furrow-specific phosphorylation of intermediate filaments."Oncogene. 18. 2783-2788 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Goto,H., et al.: "Identification of a novel phosphorylation site on histone H3 coupled with mitotic chromosome condensation."J.Biol.Chem.. 274. 25543-25549 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Inagaki,N., et al.: "Activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase IIwithin post-synaptic dendritic spines of cultured hippocampal neurons."J.Biol.Chem.. 275. 27165-27171 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Izawa,I., et al.: "Identification of Mrj, a DnaJ/Heat shock protein 40family protein, as a keratin 8/18 filament-regulatory protein."J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Togashi,H., et al.: "Functions of a Rho-specific guanine nucleotide-exchange factor, in neurite retraction : Possible involvement of proline-rich motif of KIAA0380 in the localization."J.Biol.Chem.. 275. 29570-29578 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yasui, Y., Amano, M., Nagata, K., Inagaki, N., Nakamura, H., Saya, H., Kaibuchi, K., and Inagaki, M.: "Roles of Rho-associated kinase in cytokinesis ; Mutations in Rho-associated kinase phosphorylation sites impair cytokinetic segregation of glial filaments."J.Cell Biol.. 143. 1249-1258 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kosako, H., Goto, H., Yanagida, M., Matsuzawa, K., Fujita, M., Tomono, Y., Okigaki, T., Odai, H., Kaibuchi, K., and Inagaki, M.: "Specific accumulation of Rho-associated kinase at the cleavage furrow during cytokinesis ; Cleavage furrow-specific phosphorylation of intermediate filaments."Oncogene. 18. 2783-2788 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Goto, H., Tomono, Y., Ajiro, K., Kosako, H., Fujita, M., Sakurai, M, Okawa, K., Iwamatsu, A., Okigaki, T., Takahashi, T., and Inagaki, M.: "Identification of a novel phosphorylation site on histone H3 coupled with mitotic chromosome condensation."J.Biol. Chem. 274. 25543-25549 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Inagaki, N., Nishizawa, M., Minakata, Y., Yamamoto, H., Takeuchi, Y., Miyamoto, E., Kaibuchi, K., and Inagaki, M.: "Activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase llwithin post-synaptic dendritic spines of cultured hippocampal neurons."J.Biol. Chem. 275. 27165-27171 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Izawa, I., Nishizawa, M., Ohtakara, K., Ohtsuka, K., Inada, H., and Inaqaki, M.: "Identification of Mrj, a DnaJ/Heat shock protein 40family protein, as akeratin 8/18 filament-regulatory protein."J.Biol. Chem. 275. 34521-34527 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Togashi, H., Nagata, K., Takagishi, M., Saitoh, M., and Inagaki, M.: "Functions of a Rho-specific guanine nucleotide-exchange factor, in neurite retraction : Possible involvement ofproline-rich motif of KIAA0380 in the localization."J.Biol. Chem.. 275. 29570-29578 (2000)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yasui,Y., et al.: "Roles of Rho-associated kinase in cytokinesis ; Mutations in Rho-associated kinase phosphorylation sites impair cytokinetic segregation of glial filaments."J.Cell Biol.. 143. 1249-1258 (1998)
• [文献書誌] Kosako,H., et al.: "Specific accumulation of Rho-associated kinase at the cleavage furrow during cytokinesis ; Cleavage furrow-specific phosphorylation of intermediate filaments."Oncogene. 18. 2783-2788 (1999)
• [文献書誌] Goto,H., et al.: "Identification of a novel phosphorylation site on histone H3 coupled with mitotic chromosome condensation."J.Biol.Chem.. 274. 25543-25549 (1999)
• [文献書誌] Inagaki,N., et al.: "Activation of Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase IIwithin post-synaptic dendritic spines of cultured hippocampal neurons."J.Biol.Chem.. 275. 27165-27171 (2000)
• [文献書誌] Izawa,I., et al.: "Identification of Mrj,a DnaJ/Heat shock protein 40family protein,as a keratin 8/18 filament-regulatory protein."J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)
• [文献書誌] Togashi,H., et al.: "Functions of a Rho-specific guanine nucleotide-exchange factor,in neuriteretraction : Possible involvement of proline-rich motif of KIAA0380 in the localization. "J.Biol.Chem.. 275. 29570-29578 (2000)
• [文献書誌] Kosako, H. et. al.: "Specific accumulation of Rho-associated kinase at the cleavage furrow during cytokinesis : Cleavage furrow-specific phosphorylation of intermediate filaments"Oncogene. 18. 2783-2788 (1999)
• [文献書誌] Fujita, M. et. al.: "Cell cycle regulation of human CDC6 protein : intracellular localization, interaction with the human MCM complex and cdc2 kinase-mediated hyperphosphorylation"J. Biol. Chem.. 247. 25927-25932 (1999)
• [文献書誌] Goto, H. et. al.: "Identification of a novel phosphorylation site on histone H3 coupled with mitotic chromosome condensation"J. Biol. Chem.. 274. 25543-25549 (1999)
• [文献書誌] Inada, H. et. al.: "Balance between activities of Rho-kinase and Type 1 protein phosphatase modulates turnover of phosphorylation and dynamics of desmin/vimentin fimaments"J. Biol. Chem.. 274. 34932-34939 (1999)
• [文献書誌] Kawano, Y. et. al.: "Phosphorylation of myosin-binding subunit (MBS) of myosin phosphatase by Rho-kinase in vivo"J. Cell Biol.. 147. 1023-1038 (1999)
• [文献書誌] Goto, H. et. al.: "Regulation of Intermediate Filament Organization during Cytokinesis : Possible Roles of Rho-associated Kinase"Microsc. Res. Tech.. (in press).
• [文献書誌] H.Goto: "Phosphorylation of vimentin by Rho-associated Kinase at a uhigue amino-termnal site that is specifically phosphorylated during cytokinesis" J.Biol.Chem.273. 11728-11736 (1998)
• [文献書誌] Y.Kamei: "Visualization of mitotic radial lineage cells in the developing rat brain by cdc2 kinase-phosphorylated vimentin." GLIA. 23. 191-199 (1998)
• [文献書誌] M.Fujita: "Cell cycle-and chromatin binding state-dependent phosphorylation of human MCM heterohexameric complexesia Role for cdc2 Kinase" J.Biol.Chem. 273. 17095-17101 (1998)
• [文献書誌] H.Inada: "Rho-associated kinase phosphorylates desmin,the myogenic intermediate filament protein at unique amino terminal sites." Biochem.Biophys.Res.Commun. (in press).
• [文献書誌] Y.Yasui: "Roles of Rho-assaiated kinase in cytokinesis;Mutations in Rho-associated kinase phosphorylation sites pnpair cytokinetic segregation of glial filaments." J.Cell.Biol. 143. 1249-1258 (1998)
• [文献書誌] H.Kosako: "Specific Accumulation of Rho-associated kinase at the Cheavage Funow during cytokinesisi Cleauage furrow-spocific phesphory lation of intermediate filament." Oncogene. (in press).