| 研究課題/領域番号 |
10557082
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
皮膚科学
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
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| 研究分担者 |
秋山 真志 帝京大学, 医学部, 助教授 (60222551)
清水 宏 北海道大学, 医学部, 教授 (00146672)
天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563)
増永 卓司 株式会社コーセー, 研究員
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
13,700千円 (直接経費: 13,700千円)
1999年度: 3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
1998年度: 10,200千円 (直接経費: 10,200千円)
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| キーワード | 道化師様魚鱗癬 / 非水泡型魚鱗癬様紅皮症 / 葉状魚鱗癬 / セル・エンベロープ / トランスグルタミナーゼ / ロリクリン / 遺伝子異変 / 出生前診断 / 非水疱型魚鱗癬様紅皮症 / cornified cell envelope |
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| 研究概要 |
1)症例の集積、臨床的検討、電顕レベルでの微細構造の検討
非水泡型魚鱗癬様紅皮症、葉状魚鱗癬等の各病型に分け各家系の臨床的データを集積した。患者皮膚生検より電顕用標本を作製、cornified cell envelope、層版顆粒等の変化に注目して観察した。
2)光顕レベルでの免疫組織学的な検討、免疫電顕での患者皮膚の検討
患者皮膚生検検体よりの凍結切片を用い、光顕レベルでの免疫組織学的検索を行った。異常の認められた分子について、さらにpost-embedding免疫電顕法にて超微形態学的に検討した。
3)各家系ごとのlinkage analysis、遺伝子変異の検索
各患者家系内でmicrosatellite markersについてhaplotypeを検索、linkage analysisを行った。特に、epidermal differentiation complex(EDC)領域については、優先的にmicrosatellite markersを設定した。これらのデータと1)2)の結果を総合し、各病型、各家系ごとに原因遺伝子を推測した。標的遺伝子のgenomic DNAを増幅し、塩基配列を決定することにより遺伝子変異を同定、さらに、制限酵素消化、allele specific oligonucleotide hybridization法(ASO法)により、変異の確認を行った。
4)重症型魚鱗癬における新しい正確な病型診断法、出生前診断法の開発
免疫組織学的方法で原因分子の発現異常を明らかにする方法、あるいは、原因分子の遺伝子のsequencingにより遺伝子変異を検索する方法で、各病型ごとの正確な診断が可能となった。また、繊毛膜生検による胎児DNA採取とmutation analysisで早期の出生前診断が可能であるようなシステムを確立した。
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