| 研究課題/領域番号 |
10558138
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
医用生体工学・生体材料学
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
永森 静志 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助教授 (60119831)
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| 研究分担者 |
加藤 尚志 キリンビール株式会社, 医薬探索研究所, 主任研究員
松浦 知和 (松浦 和知) 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (30199749)
蓮村 哲 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (30189518)
大上 欽也 キリンビール株式会社, 医薬探索研究所, 研究員
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
12,000千円 (直接経費: 12,000千円)
1999年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
1998年度: 8,600千円 (直接経費: 8,600千円)
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| キーワード | ヒト由来 / 肝細胞 / 人工肝臓 / ラジアルフロー / バイオリアクター / 肝由来蛋白 / ラジアルフロー型バイオリアクター / アルブミン / AFP / TPO / 多孔質ガラス |
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| 研究概要 |
リアクターの改良はまず小型化を行い現在5から30mlタイプのリアクターを作製した。30mlタイプのリアクターはラジアルフロー型リアクター本来の機能を発現していることを確認できた。5mlリアクターについては、これを用いての培養は可能で一部の代謝実験等は可能になっているが、細胞の分布にばらつきが出るなどさらに改良の余地がある。
担体については多孔質ガラスビーズ(シラン)に加え新たに開発したヒドロキシアパタイト多孔質ビーズを作製した。FLC細胞を培養したところシラン以上に良好な培養が可能で、光学顕微鏡や電子顕微鏡で、高密度に3次元的に配列していることが確認された。FLC細胞を用いバイオリアクターで産生する事が確認できた物質は、アルブミン、AFP、NGF、TPOなどである。アルブミンやTPOに関しては申請者らの開発した高感度ELISA法により、培養液中の産生量を測定した。本システムでの産生効率はアルブミンでは、単層培養における6から7倍。TPOについては培養液中にヒト血清中と同程度の濃度で産生され従来の培養装置に比べ効率の高い培養が可能である事が証明されてた。リアクターでヒト肝由来細胞が産生したTPOを精製し、アミノ酸配列や糖鎖などの生化学的検討を行い活性との関係を解析中である。
細胞株については他施設と協同研究で製作した細胞のクローニングや不死化細胞をシステムに応用可能な状況となった。
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