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レトロウイルスライブラリーを利用した新しい発現クローニング法の開発とその応用

研究課題

研究課題/領域番号 10559006
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 広領域
研究機関東京大学

研究代表者

北村 俊雄  東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (20282527)

研究分担者 野阪 哲哉 (野坂 哲哉)  東京大学, 医科学研究所, 客員助教授 (30218309)
研究期間 (年度) 1998 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
12,900千円 (直接経費: 12,900千円)
2000年度: 3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
1998年度: 6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
キーワードレトロウイルス / 発現クローニング法 / cDNAライブラリー / シグナルシークエンストラップ / GFP / サイトカイン / サイトカインレセプター / TNFレセプター / 転写因子
研究概要

研究代表者らが開発し、1995年に発表したレトロウイルスライブラリーを利用した発現クローニング法は、応用範囲が広く種々の実験に利用できる。申請者は、GFPとのcDNAの融合ライブラリーを作成し、蛋白質の細胞内局在によって遺伝子を同定する方法(FL-REX)(Misawa et al., Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A, 2000)およびレトロウイルスcDNAライブラリーを利用したシグナルシークエンストラップ法(SST-REX)(Kojima and Kitamura, Nature Biotechnol.1999)を開発して新規遺伝子をスクリーニングのスクリーニングを行っている。FL-REX法では主に転写因子、SST-RE法ではサイトカインおよびサイトカインレセプターを探索している。FL-REX法により胎児肝細胞からZink Finger型の新規転写因子を1つ同定し解析中えある。一方、SST-REX法によりさまざまな細胞から新規分泌たんぱく質や膜たんぱく質を同定し(Fujio et al., Blood, 2000, Kojima et al., J.Biol.Chem.2000, Tsuruga et al., Biochem.Biophys.Res.Commun.2000, Sugiyama et al., Biochemistry 2000, Misawa et al., Cytogenetics and Cell genetics 2000)Th2細胞から同定した新規サイトカインレセプターDelta-1およびAGM(Aorta Gonado Mesonephros)領域から同定した新規分泌たんぱく質tsgに関しては現在ノックアウトマウス作製を含めて解析中である。また最近マウスマスト細胞のシグナルシークエンストラップライブラリーをスクリーニングし、シグナルシークエンスを含む新規の遺伝子の断片を約100種同定し解析中である。

報告書

(4件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 1998 実績報告書
  • 研究成果

    (50件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (50件)

  • [文献書誌] Fujio, K.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor similar to the common gamma chain."Blood. 95. 2204-2211 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Misawa, K.: "Molecular cloning and tissue distrubution of a mouse homologue of human LIGHT, a member of TNF super family."Cytogenetics and Cell Genetics. 89. 89-91 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Misawa, K.: "A novel method to identify cDNAs based on localization of the GFP-fusion products."Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. 97. 3062-3066 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Morita, S.: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging."Gene Therapy. 7. 1063-1066 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tsuruga, H.: "Identification of novel membrane and secreted proteins upregulated during adipocyte differentiation."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272. 293-297 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kojima, T.: "Troy, a newly identified member of the tumor necrosis factor receptor superfamily exhibits a homology with Edar and is expressed in embryonic skin and hair follicles."J.Biol.Chem.. 275. 20742-20747 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawashima, T.: "MgcRacGAP is involved in the control of growth and differentiation of hematopoietic cells."Blood. 96. 2116-2124 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sugiyama, T.: "A novel low-density lipoprotein receptor-related protein mediating cellular uptake of apolipoprotein E-enriched β-VLDL in vitro."Biochemistry. 39. 15817-15825 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirose, K.: "Involvement of MgcRacGAP in cytokinesis through associating with mitotic spindle and midbody."J.Biol.Chem.. (in press). (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fujio, K., Nosaka, T., Kojima, T., Kawashima, T., Yahata, T., Copeland, N.G., Gilbert, D.J., Jenkins, N.A., Yamamoto, K, Nishimura, T., and Kitamura, T.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor similar to the common gamma chain."Blood. 95. 2204-2211 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Misawa, K., Nosaka, T., Kojima, T., Hirai, M.and Kitamura, T.: "Molecular cloning and characterization of a mouse homolog of human TNFSF14, a member of the TNF superfamily."Cytogenetics and Cell Genetics. 89. 89-91 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Misawa, K., Morita, S., Nosaka, T., Kaneko, A., Nakahata, T., Asano, S.and Kitamura, T.: "A method to identify cDNAs based on localization of green fluorescent protein fusion products."Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. 97. 3062-3066 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Morita, S., Kojima, T., and Kitamura, T.: "Plat-E : an efficient and stable system for transient packaging of retroviruses."Gene Therapy. 7. 1063-1066 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tsuruga, H., Kumagai, H., Kojima, T., and Kitamura, T.: "Identification of novel membrane and secreted proteins upregulated during adipocyte differentiation."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272. 293-297 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kojima, T., Morikawa, Y., Copeland, N.G., Gilbert, D.J., Jenkins, N.A., Senba, E.and Kitamura, T.: "Troy, a newly identified member of the tumor necrosis factor receptor superfamily, exhibits a homology with Edar and is expressed in embryonic skin and hair follicles."J.Biol.Chem.. 275. 20742-20747 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kawashima, T., Hirose, K., Satoh, T., Ikeda, Y., Kaziro, Y., Nosaka, T.and Kitamura, T.: "MgcRacGAP is involved in the control of growth and differentiation of hematopoietic cells."Blood. 96. 2116-2124 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sugiyama, T., Kumagai, H., Morikawa, Y., Wada, Y., Sugiyama, A., Yasuda, K., Yokoi, N., Kojima, T., Nosaka, T., Senba, E., Kimura, S., Kadowaki, T., Kodama, T., and Kitamura, T.: "A novel low-density lipoprotein receptor-related protein mediating cellular uptake of apolipoprotein E-enriched β-VLDL in vitro."Biochemistry. 39. 15817-15825 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hirose, K., Kawashima, T., Iwamoto, I., Nosaka, T., and Kitamura, T.: "Involvement of MgcRacGAP in cytokinesis through associating with mitonic spindle and midbody."J.Biol.Chem.. (in press). (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fujio,K.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor similar to the common gamma chain."Blood. 95. 2204-2211 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Misawa,K.: "Molecular cloning and tissuedistrubution of a mouse homologue of human LIGHT, a member of TNF super family."Cytogenetics and Cell Genetics. 89. 89-91 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Misawa,K.: "A novel method to identify cDNAs based on localization of the GFP-fusion products."Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. 97. 3062-3066 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Morita,S.: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging."Gene Therapy. 7. 1063-1066 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Tsuruga,H.: "Identification of novel membrane and secreted proteins upregulated during adipocyte differentiation."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 272. 293-297 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kojima,T.: "Troy, a newly identified member of the tumor necrosis factor receptor superfamily exhibits a homology with Edar and is expressed in embryonic skin and hair follicles."J.Biol.Chem.. 275. 20742-20747 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kawashima,T.: "MgcRacGAP is involved in the control of growth and differentiation of hematopoietic cells."Blood. 96. 2116-2124 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Sugiyama,T.: "A novel low-density lipoprotein receptor-related protein mediating cellular uptake of apolipoprotein E-enriched β-VLDL in vitro."Biochemistry. 39. 15817-15825 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Hirose,K.: "Involvement of MgcRacGAP in cytokinesis through associating with mitotic spindle and midbody."J.Biol.Chem.. (in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Yang,Y-L.: "Receptors for polytropic and xenotropic murine leukemia viruses encoded by a single gane at Rmc1"Nature Genetics. 21. 216-219 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Nosaka,T.: "Identification and characterizarion of constitutively active STAT5"Molecular Biology of Hematopoiesis 6. 277-287 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Kojima,T.: "A novel signal sequence trap method using retrovirus-mediated gene transfer"Nature Biotechnol.. 17. 487-490 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Nosaka,T.: "STAT5 as a molecular regulator of proliferation,differentiation,and apoptosis in hematopoietic cells"EMBO J.. 18. 4754-4765 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Kitamura,T.: "Isolation of cDNAs for T cell antigens by retrovirs-mediated expression cloning"T Cell Protocols,Methods in Molecular Biology.. 143-152 (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Fujio,K.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor"Blood. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Misawa,K.: "Molecular cloning and tissue distrubution of a mouse homologue of human LIGHT,a member of TNF super family"Cytogenetics and Cell Genetics. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Misawa,K.: "A novel method to identify cDNAs based on localization of the GFP-fusion products"Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Morita,S: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging"Gene Therapy. (in press). (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Onishi,M.: "Cytokine receptors:Structures and signal transduction." Int.Rev.Immunol.16. 617-634 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kitamura,T.: "New experimental approaches in retrovirus-mediated expression screeing." Int.J.Hematol.67. 351-359 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Hata,D.: "Involvement of Bruton's tyrosine kinase in FceRI-dependent mast cell degranulation and cytokine production." J.Exp.Med.187. 1235-1247 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Morikawa,Y.: "induction of synaptosomal-associated protein-23kd(SNAP-23)by various cytokines." Blood. 92. 129-135 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Onishi,M.: "Identification and characterization of a constitutive active STAT5 mutant that promotes cell proliferation." Mol.Cell.Biol.18. 3871-3879 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Jinno,A.: "Identification of the chemokine receptor TER1/CCR8 expressed in brain-derived cells and T-cells as a new coreceptor for HIV-1 infection." Biophys.Biochem.Res.Commun.243. 497-502 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kawashima,T.: "Interleukin-12 induces tyrosine phosphorylation of an 85-kDa protein associated with the interleukin-12 receptor β1 subunit." Cell.Immunol.186. 39-44 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kitamura,T.: "Activating mutations of the transmembrane domain of MPL in vitro and in vivo: Incorrect sequence of MPL-K,an alternative spliced form of MPL." Blood. 92. 2596-2597 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Dairaghi,D.J.: "RANTES-induced activation correlates with CD3 expression." J.Immunol.168. 426-433 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Duan,Y.: "Expression and functional analysis of a hemopoietic progenitor antigen,NJ-1 (114/A10),in a megakaryocytic lineage." Biochem.Biopys.Res.Commun.253. 401-406 (1998)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Kitamura,T.: "Isolation of cDNAs for T cell antigens by retrovirs-mediated expression cloning." Methods in Molecular Biology.(in press). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Nosaka,T.: "Identification and characterization of constitutively active STAT5." Molecular Biology of Hematopoiesis.(in press). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Mukasa,R.: "Core 2-containing O-glycans on CD43 are preferentially expressed in the memory subset of human CD4 T cells." Int.Immunol.(in press). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書
  • [文献書誌] Matsumura,I.: "Involvement of cyclin D1 in STAT5-mediated cell growth." EMBO J. (in press). (1999)

    • 関連する報告書
      1998 実績報告書

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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