| 研究課題/領域番号 |
10670113
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医化学一般
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
伊藤 隆司 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (90201326)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | インプリンティング / Impact / モデル生物 / メチル化 / ゲノムインプリンティング / 翻訳制御 / GCN1 / GCN2 |
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| 研究概要 |
我々が見い出した新規インプリント遺伝子Impactに関して以下の点を明らかにした。
1)酵母ホモログYih1の機能解析
Impactの酵母ホモログYih1はそのN末端領域に我々がGI motifと名付けた特異的配列を持つ。GI motifは翻訳開始因子elF2αのリン酸化酵素Gen2にも存在し、Gen1がこれに結合することがGen2の活性化には必要である。GI motifを共有するYih1は、Gen1との結合をGen2と競合することでGen2の活性化を阻害することから、翻訳開始の制御因子として働く可能性が示唆された。
2)線虫ホモログの機能解析
線虫ホモログをクローン化、RNAiによる機能破壊実験を試みたが顕著な表現型は観察されなかった。
3)ツメガエルホモログXimpactの解析
ツメガエルホモログXimpactをクローン化、X.laevisとX.borealis間のF1雑種を用いてアレル発現状況を検討し、両アレル性の発現を認めた。またXimpact mRNAの微量注入が原腸陥入に異常を来たすことより、この遺伝子の発現量の調節が正常発生にとって重要であることが示唆された。
4)哺乳類Impactの解析
ヒトホモログIMPACTをクローン化、3'UTRのSNPを利用してアレル発現を検討し、両アレル性発現を認めた。そこで両種におけるインプリンティングの差違の構造的基盤を探るべく両遺伝子のゲノム配列をBACクローンを用いて決定した。両者は全体によく保存された遺伝子構成をしていたが、インプリンティングされるマウス遺伝子にのみ特徴的縦列反復構造を持つCpGアイランドが見い出された。更にこの領域は母親由来のアレルのみがメチル化されることを明らかにした。よってこのアイランドはインプリンティングの成立に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。
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