| 研究課題/領域番号 |
10670251
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
細菌学(含真菌学)
|
|---|
| 研究機関 | 金沢大学 |
|---|
研究代表者 |
中村 信一 金沢大学, 医学部, 教授 (90019620)
|
|---|
| 研究分担者 |
小崎 俊司 大阪府立大学, 農学部, 教授 (10109895)
唐澤 忠宏 金沢大学, 医学部, 助教授 (90251917)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
|
| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
|
|---|
| キーワード | 神経毒素産生性ブチリクム菌 / 塩基配列 / ボツリヌス菌 / E型ボツリヌス毒素 / 毒素活性化 / 致死毒性 / 乳児ボツリヌス症 / 食餌性ボツリヌス中毒 / E型ボツリヌス菌 / 致死毒素 / ブチリカム菌 / 神経毒素産生性ブチリカム菌 / ボツリヌス中毒 |
|---|
| 研究概要 |
1.遺伝学的・生理学的解析
(1)中国食中毒由来6株、微山湖土壌由来5株、イタリア乳児ボツリヌス症由来2株を用いて、random amplified polymorphic DNA,パルスフィールドゲル電気泳動および神経毒素遺伝子プローブによるサザンブロッティングの3手法により分子疫学解析を行った。いずれの手法においても、イタリア由来株、中国食中毒由来株、微山湖由来株の3つのクラスターに分別された。これはアラビノースとイヌリンの分解性状の差異とも一致した。
(2)中国由来11株とイタリア由来1株の神経毒素遺伝子全塩基配列を決定した。中国由来11株の塩基配列は同一であり、アミノ酸相同性はイタリア由来と95.0%、ボツリヌス菌由来と96.9%であった。
2.毒素学的解析
重鎖を認識する4種の抗イタリア由来BL5262株毒素モノクローナル抗体(mAb)全てが中国食中毒由来KZ1885株毒素に反応しなかった。抗ボツリヌス菌E型毒素mAb 7種(軽鎖認識4種、重鎖認識3種)の内、重鎖認識1種を除いた全てがKZ1885毒素と反応した。ペプチドマッピングでは、KZ1885毒素とE型毒素は、軽鎖が同一パターン、重鎖に部分的差異を示し、BL5262は2つの毒素とは異なることが示唆された。最終的に毒素遺伝子の塩基配列の決定によりに(1の(2))、KZ1885毒素とE型毒素は軽鎖が同一であり重鎖C末端領域が部分的に異なることが確認された。KZ1885毒素はトリプシンにより活性化を受けるが、比活性はE型毒素、BL5262毒素より約15倍低かった。
3.まとめ
(1)特定の神経毒素産生性ブチリクム菌が、それぞれ特定の広範な地域に分布している。
(2)分子構造および抗原性において、中国由来神経毒素は、同一金種(ブチリクム菌)から産生されるイタリア由来神経毒素よりボツリヌス菌E型神経毒素に近い。
|
