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ジーンターゲティングによるチロシンホスファターゼPTP-Jの機能の解析

研究課題

研究課題/領域番号 10670305
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 免疫学
研究機関九州大学

研究代表者

岸原 健二  九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (80214774)

研究分担者 松崎 吾朗  九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (30229455)
研究期間 (年度) 1998 – 1999
研究課題ステータス 完了 (1999年度)
配分額 *注記
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
キーワードチロシンホスファターゼ / ジーンターゲティング / ノックアウトマウス
研究概要

チロシンホスファターゼPTP-Jの機能を解明する目的で、ジーンターゲティングによってチロシンホスファターゼPTP-Jのノックアウトマウスの作製した。129/Jマウス由来のゲノムライブラリーより得られた約8.7kbのPTP-JゲノムDNAクローンをもとに組換え用ベクターを構築した。そのベクターDNAを電気穿孔法で胚幹細胞株(ES細胞)に導入し、G418存在下で選択した結果、相同組み換えによる目的の変異が導入されたES細胞(D11)を得た。その頻度は、1/1200であった。C57BL/6マウス由来の胚盤胞へのD11のマイクロインジェクションによりキメラマウスが得られ、C57BL/6マウスと交配を繰り返し、最終的にPTP-Jノックアウトマウス(PTP-J^</->マウス)が得られた。PTP-J^</->マウスにおいて、胎生期の発生、繁殖能力、胸腺や末梢リンパ組織における免疫細胞に異常は認められなかった。したがって、PTP-Jの機能は、ほかのPTPで補償されていると考えられる。現在、PTP-J発現細胞におけるタンパクのチロシンリン酸化状態を解析することにより、PTP-Jの基質を解析中である。さらに、ヒトTリンフォーマ細胞株であるJurkat及びMolt-4におけるhPTP-J遺伝子の発現調節を調べる目的で、Jurkat及びMolt-4を種々のシグナル伝達分子の阻害剤や刺激物質の存在下で培養して、hPTP-JmRNAの発現レベルをノーザンブロッティングで解析した。その結果、hPTP-Jの発現調節には、PKC、PTP、Ca^<2+>-カルモデュリン依存性プロテインキナーゼIV、Rasが関与していることが明らかとなった。

報告書

(3件)
  • 1999 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1998 実績報告書
  • 研究成果

    (3件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (3件)

  • [文献書誌] Bing Wang, Kenji Kishihara, Dongiei Zhang, Taiji Sakamoto, Kikuo Nomoto: "Transcriptional regulation of a receptor tyrosine phosphatsegene Hptp-J by PKC-mediated signaling pathways in Jurkatand Molt-4 T lymphoma cells"Biochemica et Biophysica Acta. 1450. 331-340 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Bing Wang, Kenji Kishihara, Donglei Zhang, Taiji, Sakamoto, and Kikuo Nomoto: "Transcriptional regulation of a protein tyrosine phosphatase gene hPTP-Jby PKC-mediated signaling patyways in Jurkat and Molt-4 T lymphoma cells"Biochemica et Biophysica Acta. 1450. 331-340 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1999 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Bing Wang,Kenji Kishihara,Donglei Zhang,Taiji Sakamoto,Kikuo Nomoto: "Transcriptional regulation of a receptor tyrosine phosphatsegene hPTP-J by PKC-mediated signaling pathways in Jurkatand Molt-4 T lymphoma cells"Biochemica et Biophysica Acta. 1450. 331-340 (1998)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1998-04-01   更新日: 2016-04-21  

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