| 研究課題/領域番号 |
10670982
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
腎臓内科学
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
斉藤 喬雄 東北大学, 医学部附属病院, 助教授 (10125552)
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| 研究分担者 |
佐藤 博 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (60215829)
及川 眞一 東北大学, 大学院・医学研究科, 講師 (30142946)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | リポ蛋白糸球体症 / リポ蛋白血栓 / アポ蛋白E / 脂肪染色法 / ネフローゼ症候群 / 免疫電顕法 / オフローゼ症候群 |
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| 研究概要 |
リポ蛋白糸球体症(LPG)の病因と考えられる異常アポ蛋白Eが腎局所においてリポ蛋白血栓を形成する状況を、電子顕微鏡(電顕)観察に、免疫電顕法、樹脂ブロックにおける脂肪染色法などを併用することで明らかにし、同時に、このような異常症での糸球体毛細管内の脂肪顆粒と血漿リポ蛋白所見の関係について検討した。
1.対象:ApoE Sendaiを有するLPGの他に、18個のアミノ酸残基欠損型および3個のアミノ酸残基欠損型のアポE異常を有するLPGのそれぞれの腎生検標本を対象とした。また、ApoE Sendai組み換えウイルスベクターを注入したアポEノックアウトマウスにおけるLPG実験モデルの腎標本についても検討を行った。
2.アポ蛋白Eの免疫組織学的検討:LPG腎生検凍結標本および実験モデル摘出腎凍結標本において、抗アポE抗体を用い酵素抗体法を行った後、エポン樹脂包埋ブロックを作製し、電顕観察を行った。その結果、糸球体毛細管腔内に見られるいわゆるリポ蛋白血栓において、脂肪滴の周囲にアポEの沈着が観察された。
3.エポン包埋樹脂連続切片を用いた脂質染色と電顕観察による検討:LPGのリポ蛋白血栓内で観察される脂肪滴の性状をより明確にするために、電顕観察を行った超薄切切片の連続切片にズダン染色を行った。その結果、糸球体のリポ蛋白血栓は不飽和脂肪酸を含むトリグリセリドが主体であることが示唆された。この結果は、動物実験モデルでも同様であったが、ブロック作製時のp-フェニレンジアミン処理でより詳細な検討ができた。
4.糸球体毛細管内脂肪顆粒と血漿リポ蛋白異常:脂肪顆粒の大きさと血漿やそのHDL分画におけるトリグリセリド/コレステロール比が相関し、その小型化とともに病態が進行することを示した。
以上の結果から、異常アポEによるリポ蛋白血栓の実態を組織化学の面から解明することができた。
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