| 研究課題/領域番号 |
10671137
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 東京慈恵会医科大学 |
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研究代表者 |
武山 浩 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (70236511)
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| 研究分担者 |
小林 徹也 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (70256379)
田中 知行 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (10256414)
武山 浩 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (70236511)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1999年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1998年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | MAb JT-95 / ヘパリン / ファイブロネクチン / アポトーシス / モノクローナル抗体 / fibronectin / 接着因子 |
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| 研究概要 |
「MAB JT-95により認識された抗原は甲状腺癌の浸潤、転移に関与しているか?」というテーマにより研究を進めた。平成11年になりMAb JT-95と反応する(シアル酸化ファイブロネクチンを抗原として細胞表面に発現している)甲状腺癌細胞株SW1736と反応しない細胞株TTを使用し、双方にMAb JT-95を100μg/mlの濃度で添加した後、ヒトリンパ球と甲状腺癌の接着能を比較検討した。結果は以外なことにMAb JT-95を添加することにより、SW1736において癌の細胞死が顕著に認められた。
この結果より我々はMAb JT-95は細胞表面に発現しているシアル酸化されたファイブロネクチン(FN)と結合することによりSW1736に細胞死を誘導しているのではないかという仮説を立てた。この仮説を検討するためまず1)SW1736、TT双方の培養上清にMAbJT-95を10、100、1000、10000、μg/mlの濃度で添加し72時間後calorimetric assay、^3T-Thymidine incorporate assayにより評価した。SW1736においてはMAb JT-95の添加濃度に比例して細胞死が増加することが確認された。次に、MAb JT95とSW1736上のFNとの結合部位を特定するため2)Fのいくつかの領域のpeptideを合成し、MAb JT-95を一定濃度添加したSW1736にpeptideを比例した濃度添加しどのpeptideにより細胞死にinhibitionが生ずるかを検討した。この結果FNのC末端近くに存在するheparin binding inhibition付近のpetideを添加した場合inhibitionが発現することを確認した。またヘパリンをSW1736に投与したところ同様に濃度比例的に細胞死認めた。
次にこのSW1736の細胞死がnecrosisなのかapoptosisなのかを検討したところこの細胞死はapoptosisであることが確認された。
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