| 研究課題/領域番号 |
10671184
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器外科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
三好 康雄 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (50283784)
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| 研究分担者 |
小山 公美子 大阪大学, 医学部, 助手 (90294066)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
3,200千円 (直接経費: 3,200千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | β-カテニン / ディファレンシャルディスプレー法 / L-cell / 遺伝子導入 / 変異 |
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| 研究概要 |
99年度科研費報告書
β-カテニンの遺伝子異常による癌化のメカニズム解明のため、活性化したβ-カテニンにより発現が誘導される遺伝子の同定を行った。初年度、マウスの線維芽細胞由来の細胞株L-cellに、正常型β-カテニン、あるいはエクソン3を欠損した変異型β-カテニンを導入し、安定発現株を樹立した(それぞれLN cell、LM cell)。そして、LM cellにおいて導入した変異蛋白の著明な蓄積を確認した。LM cellではLN cellに比べて重層化する発育形態と、血清要求性の低下が認められ、β-カテニンによってもたらされる変化と考えられた。この系を用いたディファレンシャルディスプレー法から、各cell line間で発現量に差のある遺伝子断片を複数個単離し、遺伝子全長の塩基配列を決定した。さらに各遺伝子について、相同性のある遺伝子をデーターベースで検索したところ、2つは既知の遺伝子であったが、残り4つは新規遺伝子であることが確認された。既知の遺伝子としては、白血球の遊走に関わる蛋白と、プロテアソームのサブユニットであった。新規遺伝子のうち一つは、染色体の構造維持に関わる蛋白との相同性が認められた。その他の遺伝子に関しては、相同性を有する蛋白は報告されておらず、機能は未知である。それぞれの新規遺伝子に関しては細胞内に遺伝子を発現させることによって、機能解析をおこなった。
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