| 研究課題/領域番号 |
10671547
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
産婦人科学
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
住浪 義則 山口大学, 医学部・附属病院, 講師 (50253141)
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| 研究分担者 |
縄田 修吾 山口大学, 医学部, 助手 (60294625)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
1999年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1998年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
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| キーワード | SCC抗原-1 / SCC抗原-2 / アポトーシス / Serpin / Two-hybrid / serpin / twe・hybrid / two hybrid |
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| 研究概要 |
我々はSCC抗原-1のcDNAを各種腫瘍細胞に導入し、SCC抗原-1高発現細胞を得た上でこれらに対して抗癌剤、UV等によるアポトーシスを誘導したところ、SCC抗原-1を発現した腫瘍細胞はアポトーシスに対しより抵抗性であった。今回SCC抗原-1と非常に相同性の高いSCC高原-2においても同様のアポトーシス抑制効果があるかを調べた所、SCC抗原-2も抗癌剤や放射線によるアポトーシスを抑制した。UVあるいは抗癌剤SN-38によるアポトーシスにおいてSCC抗原-1の作用部位についてさらに詳細に検討した所、SCC抗原-1の存在はcaspase-2、caspase-8には影響を与えずBcl2の発現を誘導しアポトーシスを抑制している可能性が示唆された。しかしながら放射線によるアポトーシスにおいてはSCC抗原-1の存在によるBcl2の変化は認められなかった。このことは様々なアポトーシスによりシグナルの流れが異なること、およびSCC抗原-1がBcl2に直接働いているのではなく、それよりも上流に働いている可能性を示しているものと思われる。これらSCC抗原の細胞内での分子作用を解析するために、酵母two-hybrid systemを利用して標的分子を捜すことを試みた。SCC抗原-1及びSCC抗原-2のcDNAのcoding region全体をGAL4 DNA binding domain plasmid(pAS2-1)にcloningし、その方向及びsequenceを確認した(pAS2-SCCA1,pAS2-SCCA2)。これらの対応分子が存在すると考えられる人keratinocyteからつくられたcDNAを含むlibraryと共にpAS2-SCCA1またはpAS2-SCCA2で酵母transformしSCC抗原-1及びSCC抗原-2の生体内でのtargetを同定を試みたがcandidateがとれなかった。その原因としてSCC抗原-1、-2共に分子量45KDaと大きく核内に移行することが困難なために標的分子との結合が起きなかったと考えられた。そのため現在N末側約100アミノ酸を削ったpAS2-SCCA1delta、pAS2-SCCA2deltaを作成した。今後これらを使い標的分子の検索を施行する予定である。
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