| 研究課題/領域番号 |
10671647
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
眼科学
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
松本 光希 熊本大学, 医学部, 助教授 (70173896)
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| 研究分担者 |
平田 憲 熊本大学, 医学部・附属病院, 助手 (60295144)
村田 恭啓 熊本大学, 医学部, 助手 (80229997)
宮川 真一 熊本大学, 医学部, 助手 (10260738)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
1999年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1998年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 緑膿菌 / 角膜潰瘍 / エラスターゼ / 角膜実質細胞 / MMP-2 / MMP-9 / プロテアーゼ / 好中球 / 緑膿菌性角膜炎におけるエラスターゼ及びMMPの動態と役割 / アルカリプロチアーゼ |
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| 研究概要 |
緑膿菌性角膜炎における潰瘍形成の主たる病原因子はプロテアーゼであると考えられる。その中でも緑膿菌エラスターゼとMMPの動態と役割について検討した。まず、臨床分離株の緑膿菌を実験動物の角膜に接種して角膜炎を惹起させ、角膜内に産生されるプロテアーゼをゼラチン及びカゼイン・ザイモグラフィーを用いて解析した。その結果、種々のmatrix metalloproteinase(MMP)及び分子量24-27kDaのカゼイナーゼが検出された。MMPにはMMP-2(ゼラチナーゼA)、MMP-9(ゼラチナーゼB)及び、それらの活性型、分子量200kDa以上のゼラチナーゼが認められた。しかし、緑膿菌由来のエラスターゼは検出されなかった。これらのプロテアーゼの由来を調べるため、角膜実質細胞を培養し、その培養上清中のプロテアーゼを解析したところMMP-2が検出され、さらに、緑膿菌エラスターゼを添加するとMMP-2、MMP-9及びそれぞれの活性型が検出された。また、好中球由来のプロテアーゼを解析したところ、MMP-9、分子量200kDa以上のゼラチナーゼ、さらには分子量24-27kDaのカゼイナーゼが検出された。さらに、免疫染色(ABC法)にて角膜内のエラスターゼの局在を調べたところエラスターゼが検出できた。以上の結果より、緑膿菌性角膜炎における潰瘍形成にあずかるプロテアーゼは菌、角膜細胞及び好中球由来であり、前駆体のMMPは緑膿菌エラスターゼによって活性化されることが分かった。
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