小児悪性固形腫瘍の転移におけるインテグリンの役割に関する研究

• 研究課題/領域番号: 10671672
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児外科学
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 福重 隆彦 鹿児島大学, 医学部・附属病院, 講師 (70218907)
• 研究分担者: 野口 啓幸 鹿児島大学, 医学部, 講師 (80198580) ; 高松 英夫 鹿児島大学, 医学部, 教授 (50142427)
• 研究期間 (年度): 1998 – 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円); 1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 1998年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
• キーワード: 小児悪性固形腫瘍 / 神経芽腫 / インテグリン / 培養系神経芽腫細胞 / ウエスタンブロット法

研究概要

1.培養系神経芽腫細胞を用いたインテグリン発現度の検討
1)分子生物学的検討
ヒト神経芽腫細胞株6株とPNET株1株を用い,半定量的ウエスタンブロット法によりインテグリンβ1の発現度を測定検討した。β1サブユニットはSK-N-SH,SK-N-MC,IMR32,NB1で比較的強く発現し,SK-N-DZ,NB39では発現が減弱していた。PNET株では両者ともほとんど発現していなかった。発現度は,N-myc増幅株で若干減弱する傾向は見られたものの,今回の実験ではN-myc増幅度との間には明らかな関連性は見られず,カドヘリンの発現とも明らかな相関は見られなかった。
2)免疫組織化学的検討
培養細胞をメタノール固定した後,抗インテグリンβ1抗体を用い,蛍光抗体法による免疫組織化学的検索を行った。SK-N-SH,SK-N-MC,NB1ではほぼ全部の細胞の細胞質で発現していたが,SK-N-DZ,IMR32,NB39では発現が減弱しており,PNET株ではほとんど発現していなかった。
2.臨床材料での検討
凍結保存してある臨床材料のうち進行神経芽腫7例とマススクリーニング2例のインテグリンβ1発現度をウエスタンブロット法で測定し,臨床所見と比較した。マススクリーニング症例と比べ,進行神経芽腫ではインテグリンの発現が減弱する傾向にあったが,stage,病理組織所見,N-myc増幅度,TRK-A発現度との間に明らかな関連性は見られなかった。進行神経芽腫の転移巣は1例のみ検討したが,インテグリンβ1が強く発現していた。