| 研究課題/領域番号 |
10672070
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物系薬学
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| 研究機関 | 北陸大学 |
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研究代表者 |
大屋敷 孝雄 北陸大学, 薬学部, 教授 (00100488)
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| 研究分担者 |
佐藤 栄子 北陸大学, 薬学部, 助手 (20298368)
高寺 恒雄 北陸大学, 薬学部, 助教授 (90121277)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1999年度: 200千円 (直接経費: 200千円)
1998年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
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| キーワード | アルミニウム / アルミニウム毒性 / 細胞死 / アポトーシス / 神経成長因子(NGF) / アルミニウム・マルトレート / PC12細胞 / 神経成長因子 / 細胞障害 |
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| 研究概要 |
アルミニウム(Al)の細胞毒性についてラット副腎髄質褐色細胞腫由来のPC12細胞を用いて調べた。なお、Alとしては、塩化アルミニウム(AlCl_3)及びアルミニウム・マルトレート錯体(Almal)を用いて、比較検討した。(1)PC12細胞を種々濃度(0.1〜1mM)のAlCl_3で3日間処理したところ、いずれの濃度においても細胞形態の変化(球変化)及び細胞凝集がみられた。一方、細胞死の指標であるLDHの細胞外遊出やMTT活性の低下などは1mM AlCl_3処理によってやや認められたが、その程度は僅かであった。また、クロマチンの凝集(H33258染色)やびDNA断片化などは1mM AlCl_3処理によっても観察されなかった。(2)一方、膜透過性の高いAlmalで細胞を処理した場合は、AlCl_3の約1/3量である0.3mMでトリパンブルー染色細胞の増加、LDHの細胞外遊出、MTT活性の低下、クロマチンの凝集及びDNA断片化が観察された。しかも、Almal処理によるLDHの細胞外遊出及びMTT活性の低下の程度は細胞内のAlmal蓄積量に依存していた。これらの結果から、Alの細胞毒性はAlの細胞内蓄積量に依存して発現し、しかもAlによる細胞死はアポトーシス様細胞死を介して進行することが明らかにされた。また、Almal処理(0.3mM)によるDNA ladderの出現は処理3日後からみられ、このことからも細胞内Al濃度がある濃度域を越えると、その毒性が発現すると考えられた。(3)Almal処理による細胞死は神経成長因子であるNGFの存在下で効果的に抑制された。濃度依存性の実験から50%の細胞死抑制効果を示すNGF濃度は25ng/mlであった。しかし、細胞をあらかじめNGF受容体の抗体で処理するとNGFの保護効果は消失し、このことからAlmalによる細胞毒性の発現にはNGF受容体を介したシグナル伝達機構が関与していると考えられた。
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