研究課題/領域番号 |
10740390
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研究種目 |
奨励研究(A)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
動物生理・代謝
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研究機関 | 山口大学 |
研究代表者 |
山中 明 山口大学, 理学部, 助手 (20274152)
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研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1999年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1998年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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キーワード | Papilio xuthus / 蛹表皮褐色化ホルモン / 昆虫内分泌 / Papilio xathus |
研究概要 |
【アゲハチョウ蛹表皮褐色化ホルモンの精製および遺伝子構造解析】 1.6000個体のアゲハチョウ緑色蛹の脳を摘出し、アゲハチョウ蛹表皮褐色化ホルモン粗抽出液(2%NaCl抽出液)を調製した。このホルモンを部分精製するためにセファデックスG-50ゲル濾過クロマトグラフィーを行った。この結果より、蛹表皮褐色化ホルモンは、分子量約3000〜4000であることが明かとなった。また、イオン交換樹脂への吸着性から塩基性のペプチドであることが分かった。更に、逆相クロマトグラフィーにより精製を進めたが、精製には至らなかった。出発材料を増やし、効率の良い精製方法の確立をする必要が示唆された。 2.アゲハチョウ緑色蛹の脳のcDNAライブラリー作製を行った。 【蛹化条件の違いによるアゲハチョウ前蛹期幼虫体内の代謝機構の解析】 緑色蛹および褐色蛹を生じる条件下に置き、両条件下で得られた前蛹の脳内アミンの定量を行なったところ、両者間でのアミン量の違いが認められたので、現在、前蛹期から蛹期の各発育ステージにおけるアミン量の変動を再度、検討中である。 【蛹表皮の色を決定するシグナル伝達物質の検索】 前蛹期幼虫頭部の感覚器を切除する実験を行ったが、蛹表皮の色を決定する感覚器の同定には至らなかった。そこで、蛹褐色化ホルモンの産生細胞および分泌経路を調べるため、前胸神経節よりコバルトリジンを用い、神経を染色した。前胸神経節より脳へと至る経路が染色されたが、染色された脳細胞が蛹褐色化ホルモンの産生細胞であるとは断定できないので、再度検討が必要である。
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