SH2ドメインを含む新規シグナル分子の遺伝子破壊による機能解析

• 研究課題/領域番号: 10770146
• 研究種目: 奨励研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 免疫学
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 石合 正道 関西医科大学, 医学部, 助手 (90298844)
• 研究期間 (年度): 1998 – 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円); 1999年度: 600千円 (直接経費: 600千円); 1998年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
• キーワード: BCRシグナル / Syk / Btk / BLNK / PLC-γ2活性化 / Rac活性化 / チロシンリン酸化

研究概要

BCR(B細胞抗原受容体)はB細胞上に発現しており、BCRを介して細胞内にシグナル伝達されることが、B細胞の活性化・分化に必須である。BCR刺激により最初に活性化されるPTKの内、Sykが重要な役割を担っていることが欠損B細胞、knock-out mouseの解析より明らかにされていた。従って、Sykのターゲット蛋白質の単離とその蛋白質のBCRシグナルにおける機能解析を目的として研究を行った。
Sykによって、チロシンリン酸化される蛋白質(BLNK)を単離し、ノックアウトB細胞を樹立し解析した結果、BLNKはPLC-γ2,Racの活性化に必須であることが明らかになった。
更に、PLC-γ2のSH2ドメインがリン酸化されたBLNKに直接結合すること、又、BtkもそのSH2ドメインを用いて、BLNKに結合し、BLNK/PLC-γ2/Btkの複合体が形成されることが、PLC-γ2活性化に必要であることを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Ishiai,M.et al.: "BLNK required for coupling Syk to PLCγ2 and Rac1-JNK in B cells."Immunity. 10. 117-125 (1999)
• [文献書誌] Guinamard,R.et al.: "B cell antigen receptor engagement inhibits Stromal cell-derived Factor(SDF)-1α chemotaxis and promotes Protein kinase C(PKC)-induced internalization of CXCR4."J.Exp.Med.. 189. 1461-1466 (1999)
• [文献書誌] Ishiai,M.et al.: "Association of Phospholipase C-γ2 Src homology 2 domains with BLNK is critical for B cell antigen receptor signaling."J.Immunol.. 163. 1746-1749 (1999)
• [文献書誌] Hashimoto,S.et al.: "Identification of the SH2 domain binding protein of Bruton's tyrosine kinase as BLNK:Functional signficance of Btk-SH2 domain in B-cell antigen receptor-coupled calcium signaling."Blood. 94. 2357-2364 (1999)
• [文献書誌] DeBell,K.E.et al.: "Functional independence and interdependence of the Src-homology domains of phospholipase C-γ1 in B-cell receptor signal transduction."Mol,Cell.Biol.. 19. 7388-7398 (1999)
• [文献書誌] Kurosaki,T.et al.: "Regulation of phospholipase C-γ2 pathway in B cells."Immunol.Rev.. (in press). (2000)
• [文献書誌] Ishiai,M.,et al.: "BLNK required for coupling Syk to PLC-γ2 and Rac1-JNK in B cells." Immunity. (in press). (1999)