| 研究課題/領域番号 |
10770553
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| 研究種目 |
奨励研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
内分泌学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
清水 力 北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (00292029)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1999年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1998年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
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| キーワード | 副腎皮質 / ホルモン受容体 / 転写調節機構 / 副腎皮質刺激ホルモン / 転写因子 / 遺伝子 / 組織特異性 |
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| 研究概要 |
1.副腎特異的エンハンサー領域の決定
pGV-lucにβアクチンプロモーターを組み込んだヘクター(βApGV-luc)に5上流ゲノムDNAを3側より順次欠質させた変異DNAや中間配列を欠質させたDNA断片を結合させ、Y-1細胞に遺伝子導入しルシフェラーゼ活性を測定することによりエンハンサー領域を決定した。副腎やY-1細胞より精製した核抽出物を用いて、エンハンサー活性を持つ領域に対してDNaselフットプリント法やゲルシフト解析、位置指定変異導入法により確定した。
2.副腎特異的転写因子のクローニング
決定した塩基配列をプローブとして副腎mRNAより作製した発現cDNAライブラリーをスクリーニングすることにより副腎特異的転写因子をクローニングした。
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