| 研究課題/領域番号 |
10877037
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| 研究種目 |
萌芽的研究
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
実験病理学
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
発地 雅夫 信州大学, 大学院・医学研究科, 教授 (00020743)
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| 研究分担者 |
佐野 健司 信州大学, 医学部・附属病院, 講師 (50205994)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
2000年度: 500千円 (直接経費: 500千円)
1999年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1998年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
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| キーワード | VEカドヘリン / Ca^<2+>-dependent homophilic adhesion / extravasation / Leukocytosis / VE カドヘリン / Ca^<2+>dependent homophilic adhesion / Lenkocytosis |
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| 研究概要 |
血管内皮細胞のParacellular pathwayは白血球が血管外に遊出する際の主要経路である。
Paracellularpathwayに位置するV-cadherinの白血球透過性に対する役割を検討した。
V-cadherin全長のcDNAを導入した培養細胞(CHO/V-cad)とV-cadherinの細胞内ドメインを切断したcDNAを導入した培養細胞(CHO/V-cad△cp)のstableなCelllineを確立した。
細胞染色でCHO/V-cad細胞はV-cadherin陽性、α-,β-cateninも陽性であるのに対して、CHO/V-cad△cp細胞はV-cadherin陽性だが、α-,β-cateninは陰性であった。
2層式の培養プレートの上層にCHO/V-cadとCHO/V-cad△cpをそれぞれコンフルエントに培養し、白血球を上層に添加して下層には走化因子(ロイコトリエンや補体)を添加する。その結果、CHO/V-cad細胞、CHO/V-cad△cp細胞、CHO細胞を比較すると、CHO細胞が最も白血球をよく通し、次にCHO/V-cad△cp細胞、そしてCHO/V-cad細胞であった。
今度は、同様に2層式の培養プレートの上層に上記3種の細胞をそれぞれコンフルエントに培養し,上層にV-cadherin抗体を追加することによる白血球の遊走能に対する影響を検討した。その結果、CHO細胞では影響はなく、CHO/V-cad細胞、CHO/V-cad△cp細胞ともに特異抗体を加えない時よりも、透過性が亢進しCHO細胞の透過性と近似していた。
従って、V-cadherinは内皮細胞のParacellularpathwayを通る白血球透過性に深く関与しているものと考えられた。
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