血管特異的コンディショナルターゲティングによるRAMP2の病態生理学的意義の解明

• 研究課題/領域番号: 10J07696
• 研究種目: 特別研究員奨励費
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 国内
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 小山 晃英 信州大学, 医学系研究科, 特別研究員(DC1)
• 研究期間 (年度): 2010 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円); 2012年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2011年度: 700千円 (直接経費: 700千円); 2010年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
• キーワード: アドレノメデュリン / RAMP2 / 血管内皮細胞 / 血管新生 / 血管恒常性 / 遺伝子欠損マウス / 臓器保護 / 細胞骨格 / 血管の恒常性 / リンパ管新生 / RAMP / 血管

研究概要

アドレノメデュリン(AM)は多くの組織に分布し、血管拡張作用に加え、抗炎症作用、臓器保護作用など、多彩な生理活性を有するペプチドである。AMノックアウトマウス(AM-/-)は、血管の構造異常により胎生致死となる。更に、AMの受容体活性調節タンパクであるRAMP2のノックアウトマウス(RAMP2-/-)はAM-/-同様、血管の発達不全、構造異常により胎生致死となる事から、RAMP2によって、AMの血管新生作用が規定されていることを、我々はこれまで報告してきた。
本研究では、血管のAM-RAMP2系の病態生理学的意義を解明するために、血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行なった。E-RAMP2-/-のほとんどは出生前後に致死であり、成体での解析に限界があった。このため本年度の研究では、成体になってからRAMP2欠損誘導を可能とする、薬剤誘導性血管内皮細胞特異的RAMP2コンディショナルノックアウトマウス(DI-E-RAMP2-/-)ラインを樹立し、解析を行った。
DI-E-RAMP2-/-では、RAMP2欠損誘導後早期から、血管透過性亢進に伴う全身性浮腫の発症が認められた。このときの血管内皮細胞は、細胞骨格を担うアクチンが重合不全を起こしており、cortical actin ringの形態異常が認められた。アクチン重合を制御するRhoファミリーの活性を検討したところ、DI-E-RAMP2-/-の血管内皮細胞では、Rac1の活性が低下しており、RhoAの活性が亢進していた。一方、血管内皮細胞にAMを添加すると、cortical actin ringは増強し、その作用はRac1阻害剤により抑制された。
以上の結果から、AM-RAMP2系が血管内皮細胞の細胞骨格形成を制御しており、血管の恒常性維持に必須であることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Novel regulation pf cardiac metabolism and homeostasis by the adrenomedullin- receptor activity-modifying protein 2 system (2013)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Yoshizawa, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Hisaka Kawate, Yasuhiro Iesato, Teruhide Koyama, Ryuichi Uetake, Lei Yang, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Yuichi Toriyama, Kyoko Igarashi, Tsutomu Nakada, Toshihide Kashihara, Mitsuhiko Yamada, Hayato Kawakami, Hiroki Nakanishi, Ryo Taguchi, Tsuyoshi Nakanishi, Hiroshi Akazawa, Takayuki Shindo
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 61 号: 2 ページ: 341-351
  • DOI: 10.1161/hypertensionaha.111.00647
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vascular Endothelial Adrenomedullin-RAMP2 System 18 Essential for Vascular Integrity and Organ Homeostasis (2013)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama. Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Tbriyama, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • 雑誌名: Circulation 巻: 127 号: 7 ページ: 842-853
  • DOI: 10.1161/circulationaha.112.000756
  • 査読あり
• [雑誌論文] 発生および病態におけるアドレノメデュリン-RAMP2システムの役割 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 雑誌名: 信州医学雑誌 巻: 60 ページ: 163-165
  • 査読あり
• [雑誌論文] Endogenous CGEP protects against neointimal hyperplasia following wire-induced vascular injury (2012)
  • 著者名/発表者名: Lei Yang, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Hisaka Kawate, Takahiro Yoshizawa, Tteruhide Kovama. Yasuhiro Iesato, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Yuichi Toriyama, Kyoko Igarashi, Takayuki Shindo
  • 雑誌名: Journal of Molecular and Cellular Cardiology 巻: 59 ページ: 55-56
  • DOI: 10.1016/j.yjmcc.2013.02.002
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血管内皮細胞のアドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 雑誌名: 血管 巻: volume34(4) ページ: 153-157
  • NAID: 10030334834
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of LYVE-1/stabilin-2-positive liver sinusoidal endothelial-like cells from embryoid bodies by modulation of adrenomedullin-RAMP2 signaling (2011)
  • 著者名/発表者名: Takuma Arai, Teuhide Koyama, Takayuki Shindo, et al
  • 雑誌名: peptides 巻: Volume32(9) 号: 9 ページ: 1855-65
  • DOI: 10.1016/j.peptides.2011.07.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] アドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持と発生および老化の制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 雑誌名: BIOMEDICAL CERONTOLOGY 巻: Volume34, NO.3 ページ: 27-30
  • NAID: 10026696394
  • 査読あり
• [学会発表] Adrenomedullin-RAMP2 system is essential for regulation of endothelial cytoskeletal organization and vascular homeostasis (2012)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama, Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Tbriyama, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, 、Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • 学会等名: 第20回日本血管生物医学会学術集会
  • 発表場所: 徳島
  • 年月日: 2012-12-07
• [学会発表] Vascular Endothelial Adrenomedullin-RAMP2 System is Essential for Vascular Integrity and Organ Homeostasis (2012)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama, Laura Ochoa-Callejero, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Ichikawa-Shindo, Nobuyoshi Iinuma, Takuma Arai, Takahiro Yoshizawa, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Ryuichi Uetake, Ayano Okimura, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Toriyama, Hisaka Kawate, Ralf H. Adams, Hayato Kawakami, Naoki Mochizuki, Alfredo Martinez, Takayuki Shindo
  • 学会等名: 第35回日本高血圧学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2012-09-20
• [学会発表] The maintenance of vascular homeostasis regulated by Adrenomedullin-RA]MP2 system (2012)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama, Takayuki Sakurai, Akiko Kamiyoshi, Yuka Shindo, Yasuhiro Iesato, Yang Lei, Takahiro Yoshizawa, Ryuichi Uetake, Akihiro Yamauchi, Megumu Tanaka, Kyoko Igarashi, Yuichi Toriyama, Takayuki Shindo
  • 学会等名: 第44回日本動脈硬化学会学術総会
  • 発表場所: 博多
  • 年月日: 2012-07-19
• [学会発表] Vascular Integrity of AM-RAMP2 System Contributes to Maintenance of Organ Protection (2012)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第76回日本循環器学会
  • 発表場所: 福岡国際会議場(福岡県)
  • 年月日: 2012-03-17
• [学会発表] Adrenomedullin-RAMP2 system, as a novel regulator of vascular endothelial integrity (2011)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第19回日本血管生物医学会
  • 発表場所: 東京ステーションコンファレンス(東京都)
  • 年月日: 2011-12-03
• [学会発表] アドレノメデュリン-RAMP2システムは血管恒常性維持に必須である (2011)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第15回日本心血管代謝内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 千里ライフサイエンスセンター(大阪府)
  • 年月日: 2011-11-25
• [学会発表] Adrenomedullin-RAMP2 system regulates vascular endothelial integrity (2011)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: 2011 American Heart Association's
  • 発表場所: Orland (USA)
  • 年月日: 2011-11-16
• [学会発表] Regulation of vascular integrity by adrenomedullin-RAMP2 system in endothelial cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: 第75回日本循環器学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)
  • 年月日: 2011-08-04
• [学会発表] Regulation of Vascular Endothelial Integrity by Adrenomedullin-RAMP2 System (2011)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: 第34回日本動脈硬化学会
  • 発表場所: ロイトン札幌(北海道)
  • 年月日: 2011-07-15
• [学会発表] Role of Adrenomedullin-RAMP2 system for vascular endothelial function (2011)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: 第29回内分泌サマーセミナー
  • 発表場所: 艮陵会館(宮城県)
  • 年月日: 2011-07-08
• [学会発表] 血管内皮細胞のアドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管恒常性維持機構 (2011)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第40回 日本心脈管作動物質学会
  • 発表場所: 香川
  • 年月日: 2011-02-04
• [学会発表] 血管内皮細胞におけるアドレノメデュリン-RAMP2システムの役割 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第18回日本血管生物医学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-12-03
• [学会発表] The role of adrenomedullin-RAMP2 system in vascular endothelial cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: 第18回日本血管生物医学会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2010-12-03
• [学会発表] アドレノメデュリン-RAMP2システムによる血管新生・血管保護作用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第33回日本高血圧学会学術集会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2010-10-15
• [学会発表] Regulation of vascular homeostasis by adrenomedullin-RAMP2 system in development and senescence. (2010)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: Asian Aging Core for Longevity 2010
  • 発表場所: チェジュ(韓国)
  • 年月日: 2010-08-23
• [学会発表] アドレノメデュリン-RAMP2系による、発生および老化における血管恒常性維持 (2010)
  • 著者名/発表者名: 小山晃英
  • 学会等名: 第33回日本基礎老化学会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2010-06-18
• [学会発表] AM-RAMP2 System, as a Novel Regulator of Angiogenesis, Vascular Integrity, and Homeostasis. (2010)
  • 著者名/発表者名: Teruhide Koyama
  • 学会等名: International Symposium on Cardiovascular Endocrinology and Metabolism
  • 発表場所: 奈良
  • 年月日: 2010-04-01
• [備考]
  • URL: http://www7a.biglobe.ne.jp/~shindo/