| 研究課題/領域番号 |
11132257
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| 研究種目 |
特定領域研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究機関 | 愛媛大学 |
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研究代表者 |
加藤 敬一 愛媛大学, 工学部, 助教授 (10117088)
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| 研究分担者 |
鈴木 洋司 愛媛大学, 医学部, 助手 (20226567)
立石 憲彦 愛媛大学, 医学部, 助手 (90236555)
菅原 卓也 愛媛大学, 農学部, 助手 (00263963)
佐藤 元通 愛媛大学, 医学部, 講師 (50162491)
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| 研究期間 (年度) |
1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1999年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 癌治療 / 癌細胞 / 遺伝子導入 / リポソーム / 脂質ベシクル / 海藻レクチン / IgM / プロテインA |
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| 研究概要 |
目的 癌細胞への"ミサイル装置"(リガンド)を装着した、人工細胞(脂質ベシクル)を創製し、DDS(Drug Delivery System)に利用することを目的とした。標的分子のリガンドとしては、大別して二種類のリガンド、すなわち、1)癌細胞の特異抗原としての糖鎖を認識するESA(トゲキリンサイ海藻由来のレクチン)、および2)癌細胞の特異抗原を認識する抗体(モデル抗体として抗IgM抗体を使用)、について研究を進める。
結果 まず、従来の二段階乳化法に代わり、新規な超音波処理法による簡便なベシクル調製法を開発した。このベシクルの粒径は約70〜120nmの範囲にあり、物質包括能はベシクル懸濁液中の全トレーサー濃度に対して、最大約8%の値となった。このベシクル膜のSpan80中に混入させたIsothiocyanic Acid Dodecyl Ester(IADE)とESAを共有結合させて、ESAをベシクル膜に活性劣化させることなく、かつ効率良くベシクルに固定化する事が出来た。このESA固定化ベシクルは癌細胞に対して特異的に結合すること、およびESAが癌細胞に対してアポトーシスを誘導することが示唆された。さらにESA、およびESA固定化ベシクルをラットに投与して検討した結果、ESA特異抗体が若干発現するものの、どのラットも体重減少も無く約5週間健康に生存し、現段階でのこのベシクルの安全性が確認された。次に、抗体のベシクル固定化については、プロテインAを媒介として、抗体のFabフラグメントを外方向に配向させて、固定化させることができた。またカチオンペプチド脂質(CPL)とIADEをSpan80中に混入させ、さらにそのIADEとプロテインAをアミド結合させた後に抗IgM抗体を固定化して、カチオン性イムノベシクルを調製した。このイムノベシクルが、IgMを産生するHB4C5に対し、標的的に結合し、ベシクル内に包括した遺伝子を効率良くHB4C5に導入出来た。
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