アデノウイルスE1A誘導アポトーシスにおけるトポイソメラーゼIIα特異的分解機構

• 研究課題/領域番号: 11144212
• 研究種目: 特定領域研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 中島 琢磨 東京医科歯科大学, 歯学部, 助教授 (90256678)
• 研究期間 (年度): 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円); 1999年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
• キーワード: トポイソメラーゼIIα / ユビキチン / アデノウイルスE1A / 癌 / アポトーシス / UbcH7 / 細胞内蛋白分解 / 細胞周期

研究概要

ヒト上皮様癌細胞株KB由来MA1細胞では、アデノウイルスE1Aの発現によるアポトーシスの誘導過程においてトポイソメラーゼ(トポ)IIαのユビキチン(Ub)化と分解がDNA断片化に先行して亢進する。この分解に先行するCaspasesの顕著な活性化が起きないことから、トポIIαの異常分解をアポトーシス開始の決定要因の一つと推定し、(1)トポIIαを標的とする分子量約17kDのUb結合酵素(E2)がUbcH7であること、(2)UbcH7は、E1A誘導アポト一シスの過程でトポIIαの分解に先行して増加すること、(3)トポIIαのUb化と分解にはUbcH7の発現上昇は不十分で、細胞周期依存的に活性化するUb-リガーゼが必要なことを報告した。本年度はトポIIαのUb化と分解の開始機構の解明を目的とし、Two-hybrid法によりトポIIαに対するUb-リガーゼを検索中である。また、抗Ub抗体を用い、in vivoでUb化されたトポIIαを解析した結果、Ub化は約150kDのトポIIα部分分解産物に対して起こることが分った。この部分分解がどの様にして起こるか解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Yageta, M., et al.: "The adenovirus E1A domains required for induction of DNA replication in G2/M arrested cells coincide with those required for apoptosis"Oncogene. 18. 4767-4776 (1999)
• [文献書誌] Shirasuna, K., et al.: "The G10BP-1 gene encoding GC box binding protein, is a target of Myc and Jun/Fos"Genes to Cells. 4. 277-289 (1999)
• [文献書誌] Takeuchi, A., et al.: "Enhancer and silencer binding proteins involved in the rat cdc2 promoter activation at the G1/S boundary"Genes to Cells. 4. 229-242 (1999)
• [文献書誌] Ohi, N., et al.: "A novel adenovirus E1B19K-binding protein B5 inhibits apoptosis induced by Nip3 by forming a heterodimer through the C-terminal hydrophobic region"Cell Death & Differentiation. 6. 314-325 (1999)
• [文献書誌] Tsunoda, H., et al.: "Effect of wild-type and mutated p53 and Id proteins on the induction of apoptosis by adenovirus E1A, c-myc, bax, and nip3 in p53 null mouse cerebellum cells"Biochem. Biophys. Res. Commum.. 255. 722-730 (1999)