ジヒドロリポアミド・サクシニル転位酵素遺伝子由来ペプチドによる神経細胞死誘導機構

• 研究課題/領域番号: 11157232
• 研究種目: 特定領域研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 麻生 定光 日本医科大学, 老人病研究所, 助教授 (70167914)
• 研究分担者: 石橋 佳朋 日本医科大学, 老人病研究所, 助手 (00312067) ; 紙野 晃人 日本医科大学, 老人病研究所, 講師 (40307955) ; 太田 成男 日本医科大学, 老人病研究所, 教授 (00125832)
• 研究期間 (年度): 1999
• 研究課題ステータス: 完了 (1999年度)
• 配分額: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円); 1999年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
• キーワード: DLST / ミトコンドリア / アルツハイマー

研究概要

我々はこれまでにジヒドロリポアミド・サクシニル転移酵素(DLST)遺伝子領域内に17ヶ所のアミノ酸置換を伴わない多型部位を見い出し、特にexon8(a)、intron11(g)、intron13(a)、exon14(c)の部位に特定の塩基置換(agac)をhomozygousにもつgenotype(agac/agac)がアルツハイマー病(AD)患者で多いことを報告した。DLST、あるいはその近傍の遺伝子変異がADの遺伝的危険因子であることが示唆された。ラット骨格筋ではDLST遺伝子から正常なDLST蛋白のほかに分子量の小さいsmall DLST(sDLST)が発現していることを我々は明らかにしている。本課題では、sDLSTの脳変性疾患への関与について検討した。ヒト5'CAPcDNAライブラリーから得られたsDLSTのcDNAの解析によって、sDLSTはintron7から転写され、exon8内の最初のATGから正常DLSTと同じフレームで翻訳されることがわかった。AD患者(n=22)の脳では健常人(n=33)の脳に比べsDLSTの発現量が有意に低く、健常人の約1/3であった(P=0.004)。GAPDHとDLSTの発現量の比はAD患者と健常人とでは有意差はなかった。AD患者と健常人の末梢血から調製したDLST遺伝子全体を含むコスミッドクローンをそれぞれラット褐色細胞腫PC12に導入したところ、AD患者由来のDLST遺伝子からのsDLSTの発現は健常人のそれに比べ約1/3低かった。DLSTの多型部位の塩基置換がsDLSTの発現を減少させていると考えられた。坑ヒトsDLST抗体でHeLa細胞のミトコンドリア画分にsDLSTを検出した。sDLSTがミトコンドリアの機能維持に関与していて、その発現減少がミトコンドリアの機能低下を引き起こしている可能性がある。

研究成果

• [文献書誌] Sayaka Ito: "Functional integrity of mitochondrial genomes in human platelets and sutopsied brain tissues from elderly patients with Alzheimer's disease"Proc. Natl. Acad. Sci. USA.. 96. 2099-2103 (1999)
• [文献書誌] Sadamitsu Asoh: "Practicable recovery of plasmids carring cDNA encoding anti-apoptotic factors that had been introduced by particle bombardment into 5-week old rat hippocampal slices"Neuroscience Letters. 272. 62-66 (1999)
• [文献書誌] Kouzin Kamino: "A family with late-onset Alzheimer's disease carrying Val91Met mutation of apolipoprotein A-II gene suggests altered plasma lipid metabolism in Alzheimer's disease"Alzheimer's disease & related disorders, (edited by K. Iqbal, D. F. Swaab, B. Winblad and H. M. Wisniewski. )John Wiley & Sons Ltd.. 501-506 (1999)
• [文献書誌] Takehiro Yasukawa: "Defect in modification at the anticodon wobble nucleotide of mitochondrial tRNA(Lys)with the MERRF encephalomyopathy pathogenic mutation"FEBS Lett.. 467. 175-178 (2000)
• [文献書誌] Takehiro Yasukawa: "Modification defect at anticodon wobble nucleotide of mitochondrial tRNAs(Leu)(UUR)with pathogenic mutations of mitochondrial myopathy, encephalopathy, lactic acidosis, and stroke-like Episodes"J. Biol. Chem.. 275. 4251-4257 (2000)
• [文献書誌] Hiroshi Shimokaa: "Distribution of geriatric disease-related genotypes in the National Institute for Longevity Sciences, Longitudinal study of again(NILS-LSA)"J. Epidemiol.. (in press). (2000)