核内受容体共役因子病の新しい疾患概念の確立

• 研究課題/領域番号: 11307017
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 内分泌学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 名和田 新 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (10038820)
• 研究分担者: 後藤 公宣 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (90284512) ; 柳瀬 敏彦 九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (30239818) ; 高柳 涼一 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (30154917) ; 野村 政壽 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (30315080) ; 岡部 泰二郎 九州大学, 医学部・附属病院, 助手 (40264030)
• 研究期間 (年度): 1999 – 2001
• 研究課題ステータス: 完了 (2001年度)
• 配分額: 32,600千円 (直接経費: 30,500千円、間接経費: 2,100千円); 2001年度: 9,100千円 (直接経費: 7,000千円、間接経費: 2,100千円); 2000年度: 7,000千円 (直接経費: 7,000千円); 1999年度: 16,500千円 (直接経費: 16,500千円)
• キーワード: Yeast two-hybrid assay / AR AF-1 / GSTプルダウン / cDNA cloning / TPR / アンドロゲン / 共役因子 / 睾丸性女性化症 / 受容体 / 不応症 / 転写 / ステロイドホルモン

研究概要

我々は,平成10,11年度で,アンドロゲン受容体のAF-1蛋白質を用いたGST-pull-down実験でアンドロゲン受容体共役因子異常症患者者で特異的に欠損する90kDaの蛋白質を同定した。
平成13年度はこの90kDaタンパク質をクローニングする目的で,アンドロゲン受容体AF-1をbaitとして,酵母Two-Hybridシステムを用いてスクリーニングした結果,941アミノ酸からなる既知のタンパク質を得た。このタンパク質はその分子内にTPR(Tetratrico Peptide Repeat)モチーフを19回反復するという特徴を有するため仮にTPRタンパク質と名付けている。このタンパク質は,レポーターアッセイでアンドロゲン受容体の転写活性化能を3〜5倍増加させ,GST pulldown assayでアンドロゲン受容体AF-1領域に直接結合することが判明しているが,エストロゲン受容体の転写活性化能は増加させない。
このTPRが本疾患の病因であるかどうかを明らかにするため現在このcDNAの12のprimerを作成し,PCRでmutationを検討中である。
更にDNAチップを使い正常細胞に比べ,本疾患患者で欠損している遺伝子を同定中である。

研究成果

• [文献書誌] Saitoh M, Yanase T, Morinaga H, Tanabe M, Mu YM, Nishi Y, Nomura M, Okabe T, Goto K, Tkayanagi R, Nawata H.: "Tributyltin or Triphenyltin Inhibits Aromatase Activity in the Human Granulosa-like Tumor Cell Line KGN"Biochem Biophys Res Commun. 289. 198-204 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Nishi Y, Yanase T, Mu Y, Oba K, Ichino I, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K., Takayanagi R, Kashimura Y, Haji M, Nawata H.: "Establishment and characterization of a steroidogenic human granulosa-like tumor cell line, KGN that expresses functional FSH receptor"Endocrinology. 142. 437-445 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yanase T, Mu YM, Nishi Y, Goto K, Nomura M, Okabe T, Tkayanagi R, Nawata H.: "Regulation of aromatase by nuclear receptors"J Steroid Biochem Mol Biol.. 79. 187-192 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Mu Y, Yanase T, Nishi Y, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K, Nawata H.: "Saturated free fatty acids, palmitic acid and stearic acid induces apoptosis of human granulosa cells"Endocrinology. 142. 3590-3597 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Tomura A, Goto K, Morinaga H, Nomura M., Okabe T, Yanase T, Takayanagi R, Nawata H.: "The subnuclear three-dimensional image analysis of androgen receptor fused to fluorescence protein"J Biol Chem. 276. 28395-28401 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Mu YM, Yanase T, Nishi Y, Takayaagi R, Goto K, Nawata H.: "Nuclear receptor constituted by PPARg : RXR heterodimers inhibits the expression of cytochrome p450 in human granulosa cells"Mol Cell Endocrinol. 181. 239-248 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Saitoh M, Yanase T, Morinaga H, Tanabe M, Mu YM, Nishi Y, Nomura M, Okabe T, Goto K, Takayanagi R, Nawata H: "Tributyltin or Triphenyltin Inhibits Aromatase Activity in the Human Granulosa-like Tumor Cell Line KGN"Biochem Biophys Res Commun.. 289. 198-204 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nishi Y, Yanase T, Mu Y, Oba K, Ichino I, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K, Takayanagi R, Kashimura Y, Haji M, Nawata H: "Establishment and characterization of a steroidogenic human granulosa-like tumor cell line, KGN that expresses functional FSH receptor"Endocrinology. 142. 437-445 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yanase T, Mu YM, Nishi Y, Goto K, Nomura M, Oka be T, Takayanagi R, Nawata H: "Regulation of aromatase by nuclear receptors"J Steroid Biochem Mol Biol. 79. 187-192 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Mu Y, Yanase T, Nishi Y, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K, Nawata H: "Saturated free fatty acids, palmitic acid and stearic acid induces apoptosis of human granulosa cells"Endocrinology. 142. 3590-3597 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tomura A, Goto K, Morinaga H, Nomura M, Okabe T, Yanase T, Takayanagi R, Nawata H: "The subnuclear three-dimensional image analysis of androgen receptor fused to fluorescence protein"J Biol Chem. 276. 28395-401 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Mu YM, Yanase T, Nishi Y, Takayanagi R, Goto K, Nawata H: "Nuclear receptor constituted by PPARg : RXR heterodimers inhibits the expression of cytochrome p450 in human granulosa cells"Mol Cell Endocrinol. 181. 239-248 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Saitoh M, Yanase T, Morinaga H, Tanabe M, Mu YM, Nishi Y, Nomura M, Okabe T, Goto K, Tkayanagi R, Nawata H.: "Tributyltin or Triphenyltin Inhibits Aromatase Activity in the human Granulosa-like Tumor Cell Line KGN"Biochem Biophys Res Commun.. 289. 198-204 (2001)
• [文献書誌] Nishi Y, Yanase T, Mu Y, Oba K, Ichino I, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K., Takayanagi R, Kashimura Y, Haji M, Nawata H.: "Establishment and characterization of a steroidogenic human granulosa-like tumor cell line, KGN that expresses functional FSH receptor"Endocrinology. 142. 437-445 (2001)
• [文献書誌] Yanase T, Mu YM, Nishi Y, Goto K, Nomura M, Okabe T, Tkayanagi R, Nawata H.: "Regulation of aromatase by nuclear receptors"J Steroid Biochem Mol Biol.. 79. 187-192 (2001)
• [文献書誌] Mu Y, Yanase T, Nishi Y, Saito M, Nomura M, Mukasa C, Okabe T, Goto K, Nawata H.: "Saturated free fatty acids, palmitic acid and stearic acid induces apoptosis of human granulosa cells"Endocrinology. 142. 3590-3597 (2001)
• [文献書誌] Tomura A, Goto K, Morinaga H, Nomura M, Okabe T, Yanase T, Takayanagi R, Nawata H.: "The subnuclear three-dimensional image analysis of androgen receptor fused to fluorescence protein"J Biol Chem. 276. 28395-28401 (2001)
• [文献書誌] Mu YM, Yanase T, Nishi Y, Takayaagi R, Goto K, Nawata H.: "Nuclear receptor constituted by PPARg : RXR heterodimers inhibits the expression of cytochrome p450 in human granulosa cells"Mol Cell Endocrinol. 181. 239-248 (2001)
• [文献書誌] Adachi M. et al: "Androgen Insensitivity Syndrome as a Possible Coactivator Disease"The New England Journal of Medicine. 343・12. 856-862 (2000)
• [文献書誌] Oba K. et al: "Transcriptional Regulation of the Human FTZ-F1 Gene Encoding Ad4BP/SF-1"Journal of Biochemistry. 128・3. 517-528 (2000)
• [文献書誌] Yi-Ming Mu et al: "A Nuclear Receptor System Constituted by RAR and RXR Induces Aromatase Activity in MCF-7 Human Breast Cancer Cells"Molecular and Cellular Endocrinology. 166. 137-145 (2000)
• [文献書誌] 名和田新 他: "ホルモンと臨床 転写共役因子による転写制御のメカニズム(48・増刊号)"36-38 (2000)
• [文献書誌] 高柳涼一 他: "ホルモンと臨床 AR活性の細胞性御因子:ARの活性発現に必須のAF-1特異的共役因子の存在を示唆するアンドロゲン不応症(48・増刊号)"44-49 (2000)
• [文献書誌] 岡部泰二郎 他: "組織培養工学 ステロイドホルモンレセプターと疾患(26・13)"507-512 (2000)
• [文献書誌] Okabe T.: "Nur77,a member of the steroid receptor superfamily,antagonizes negative feedback of ACTH synthesis and secretion by glucocorticoid in pituitary corticotrope cells"J,Endocrionol.. 156. 169-175 (1999)
• [文献書誌] Netori S.: "Chromogranin B(secretogranin I),a neurooendocrine-regulated secretory protein,is sorted to exocrins secretory granules in transgenic mice"The EMBO J,. 17. 3277-3289 (1998)
• [文献書誌] Ikuyama S.: "Expression of an orphan nuclear receptor DAX-1 in human pituitary adenomas"Clin,Endcrinol.. 48. 647-654 (1998)
• [文献書誌] Mu,Y-M.: "Low level of glucocorticoid receptor messenger ribonucleic acid in pituitary adenomas manifesting Cushing's disease with resistance to a high dose-dexamethasone suppression test"Clin,Endocrinol.. 49. 301-306 (1998)
• [文献書誌] Hamaguchi K.: "Novel germline mutations ot the MEN1 gene in Japanese patients with multiple endocrine neoplasia type"J.Hum,Genet. 44. 43-47 (1999)