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コリネ型細菌の分子生物学的解析と高度産業利用

研究課題

研究課題/領域番号 11356003
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分展開研究
研究分野 応用微生物学・応用生物化学
研究機関北海道大学

研究代表者

冨田 房男  北海道大学, 大学院・農学研究科, 教授 (60217536)

研究分担者 永井 和夫  中部大学, 応用生物学部, 教授 (00011974)
勝亦 瞭一  東北大学, 大学院・農学研究科, 教授 (60292257)
松下 一信  山口大学, 農学部, 教授 (50107736)
熊谷 英彦  京都大学, 大学院・生命科学研究科, 教授 (70027192)
中森 茂  福井県立大学, 生物資源学部, 教授 (00254243)
和地 正明  東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教授 (90192822)
研究期間 (年度) 1999 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
37,910千円 (直接経費: 35,600千円、間接経費: 2,310千円)
2001年度: 10,010千円 (直接経費: 7,700千円、間接経費: 2,310千円)
2000年度: 11,200千円 (直接経費: 11,200千円)
1999年度: 16,700千円 (直接経費: 16,700千円)
キーワードCorynebacterium glutamicum / ATP ase / NADH脱水素酵素 / アラニン / システイン / 細胞壁 / γ-グルタミルトランスペプチダーゼ / ATPase / γ-グルタミルトランスペプチターゼ / 呼吸鎖 / γ-グルタミルトランスフェラーゼ / Brevibacterium Oactofermentum
研究概要

冨田(北海道大学):C.glutamicumのH^+-ATPaseのクローニングと塩基配列の決定を行い,形質転換により活性が約2.5倍に上昇した菌株を得た.本菌株は野生株と比べ顕著な培養特性の差は見られなかったが,最大生育量及びグルタミン酸生産はやや高く,グルタミン酸生産期においては高い糖消費活性.呼吸活性,膜電位.細胞内pHを示した.
松下(山口大学):コリネ型細菌の細胞膜小胞及び反転膜小胞を調製し,それらを用いた本菌呼吸鎖のエナジエティクス解析を行った.また.本菌呼吸鎖に特徴なNADPHオキシダーゼを精製し,それがNADH脱水素酵素IIであることを明らかにするとともに.その欠損株を作成する二とで,呼吸鎖における機能とニネルギー代謝におよぼす影響を解析した.
勝亦(東北大学):C. glutamicumのアラニンデヒドロゲナーゼ遺伝子のクローニングと塩基配列の決定を行い,コリネ型細菌内で本酵素遺伝子を発現するクローンを取得した.C. glutamicumのアラニン合成は,アラニン過剰合成能を付与するトランスアミナーゼ(TA)のみによって行われることが判明した.また本遺伝子の増幅株は4.5倍のアラニン増産能を獲得した.
永井(東京工業大学):コリネ型細菌のペプチドグリカン合成に関与する遺伝子としてmurI, murC, murE, ftsIを分離した.リゾチーム感受性変異株の解析より,細胞表層合成に関与すると思われる新規アミノ基転移酵素をコードするItsA遺伝子を単離した.ItsA遺伝子の欠損によりグルタミン酸生産が誘導された.
中森(福井県立大学):B. flavum(C. glutamicum)のシステインのシステイン代謝経路の解析を行い.本菌のCysteine dehysulfuhydrase(CD)を同定し,CD欠損株によるシステイン生産について検討した.また本菌のserine acetyltransferase遺伝子を同定し,遺伝子産物の特性の解析を行った.
熊谷(京都大学):コリネバクテリウムのγ-グルタミルトランスペプチダーゼ(GGT)について遺伝子の取得を試みたが成功しなかった.大腸菌GGTの活性中心の同定と自己プロセッシング機構を証明した.コリネ型細菌の一種ビフィドバクテリウムのα-ガラクトシダーゼの性質の解明,遺伝子のクローニングを行った.

報告書

(4件)
  • 2001 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2000 実績報告書
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (44件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (44件)

  • [文献書誌] H.Sekine: "H^+-ATP ase defect in Corynebacterium glutamicum aboliches glutamic acid production with enhancement of glucose consumption rate"Appl. Microbiol. Biotechnol.. 57. 534-540 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Sakamoto: "Cytochrome C Oxidase containg an extra charged amino acid cluster in a new type of respiratory chain in the amino-acid-producing Gram-positive bacterium Caryne bacterium glutamicum"Microbiology. 147. 2865-2871 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Matsusita: "NADH dehydrogenase of Corynebacterium glutamicum Purificaion of an NADH dehydrogenase II homolog able to oxidage NADPH"FEMS Microbiol. Lett.. 204. 271-276 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Hirasawa: "L-Glutamate production by lysozyme-sensitive Corynebacterium glutamicum Its A mutant stains"BMC Biotechnol.. 1. 9 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.D.Wijayarathna: "Isolation of ftsl and murE genes involved in peptideglycan synthesis from corynebacterium glutamicum"Appl. Microbiol. Biotechnol. 55. 466-470 (2001)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Hirasawa: "A mutation in the Corynebacterium glutamicum Its A gene causes susceptibility to tysozyme, temperature-sensitive growth, and L-glutamate production"J. Bacteriol. 182. 2696-2701 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Xiao, M.: "High-yield Production and Characterization of α-Galactosidase from Bifidobacterium breve Grown on Raffinose"Biotechnol. Lett.. 22. 747-751 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Suzuki: "Improvement of the bitter taste of amino acids through the transpeptidation reaction of bacterial γ-glutamyl trans peptidase"J. Agric. Food. Chem.. 50. 313-318 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.C.Malathi: "Isolation of the mual gene from Brevibacterium lactofermenture ATTC 13869 encoding D-glntamate racemase"FEMS Microbiol. Lett.. 175. 193-196 (1999)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Wachi: "A murC gene from coryne from bacteria"Appl. Microbiol. Biotechnol. 51. 223-228 (1999)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Inoue: "Identification of catalytic nucleophile of Escherichia coli γ-glutamyltranspeptidase by γ-monofluorophosphono derivative of glutamic acid: N-terminal Thr-391 in small subunit is the nucleophile"Biochemistry. 39. 7764-7771 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake: "Handbook of pro teolytic Enzymes, 2nd Ed."London : Academic Press(in press). (2002)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 鈴木 秀之: "蛋白質核酸酵素"共立出版. 7 (2001)

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  • [文献書誌] H.Kumagai: "Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology"Springer-Verlag Berlin Heide berg. 14 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 布浦 直樹: "ビタミン"ビタミン学会. 13 (1999)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Suzuki: "Journal of Molecular Catalysis B : Enzymatic"Elsevier. 10 (1999)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Sekine: "H^+-ATPase defect in Corynebacterium glutamicum abolishes glutamic acid production with enhancement of glucose consumption rate"Applied Microbiology and Biotechnology. 57. 534-540 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J. Sakamoto: "Cytochrome c oxidase contains an extra charged amino acid cluster in a new type of respiratory chain in the amino-acid-producing Gram-positive bacterium Corynebacterium glutamicum"Microbiology. 147. 2865-2871 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K. Matsushita: "NADH dehydrogenase of Corynebacterium glutamicum. Purification of an NADH dehydrogenase II homolog able to oxidize NADPH"FEMS Microbiology Letters. 204. 271-276 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Hirasawa: "L-Glutamate production by lysozyme-sensitive Corynebacterium glutamicum ltsA mutant stains"BMC Biotechnology. 1. 9-9 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C. D. Wijayarathna: "Isolation of ftsI and murE genes involved in peptidoglycan synthesis from Corynebacterium glutamicum"Applied Microbiology and Biotechnology. 55. 466-470 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Hirasawa: "A mutation in the Corynebacterium glutamicum ltsA gene causes susceptibility to lysozyme, temperature-sensitive growth, and L-glutamate production"Journal of Bacteriology. 182. 2696-2701 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M. Xiao: "High-yield production and characterization of α -galactosidase from Bifidobacterium breve grown on raffinose"Biotechnology Letters. 22. 747-751 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M. Inoue: "Identification of catalytic nucleophile of Escherichia coli γ -glutamyltranspeptidase byγ-monofluorophosphono derivative of glutamic acid: N-terminal Thr-391 in small subunit is the nucleophile"Biochemistry. 39. 7764-7771 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Suzuki: "Improvement of the bitter taste of amino acids through the transpeptidation reaction of bacterial γ -glutamyltranspeptidase"Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50. 313-318 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K. C. Malathi: "Isolation of the murI gene from Brevibacterium lactofermentum ATCC 13869 encoding D-glutamate racemase"FEMS Microbiology Letters. 175. 193-196 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M. Wachi: "A murC gene from coryneform bacteria"Applied Microbiology and Biotechnology. 51. 223-228 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J. Hiratake: "Handbook of Proteolytic Enzymes, 2nd Ed."London: Academic Press. (in press) (2002)

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    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Suzuki: "PROTEIN, NUCLEIC ACID AND ENZYME"Kyoritsu Shuppan Co., Ltd.. 7 (2001)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Kumagai: "Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology"Springer-Verlag Berlin Heidelberg. 15 (2000)

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      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Suzuki: "Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic"Elsevier. 10 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Sekine: "H^+_-ArPase defect in Corynebacterium glutamicum abolishes glutamic acid production with enhancement of glucose consurption rate"Appl. Microbiol. Biotechnol.. 57. 534-540 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] J. Sakamoto: "Cytochrome c oxidase contains an extra charged amino acid duster in a new type of nespiratcry c Amin in the amino-acid-producing Gram-positivebacterium Cory-nebacterium glutamicum"Microbiology. 147. 2865-2871 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] K. Matsushita: "NADH dehydrogenase of Corynebacterium glutamicum, purification of an NADH dehydrogenaseII homolog able to oxidize NADPH"FEMS Microbiol. Lett.. 204. 271-276 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] T. Hirasawa: "L-Glutamate production by lysozym e-sensitive Cory-nebacterium glutamicum lts A mutant strains"BMC Biotechnol.. 1. 9 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] C.D. Wijayarathna: "Isolation of fts I and murEgenes muolved in peptidoglycan synthesis from Corynebacterium glutamicum"Appl. Microbiol. Biotechnol.. 55. 466-470 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] J. Hiratake: "Handbook of Proteolytic Enzymes, 2nd Ed."London : Academic Press. (2002)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 鈴木 秀之: "蛋白質核酸酵素"共立出版. 7 (2001)

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      2001 実績報告書
  • [文献書誌] T.Hirasawa: "A mutation in the Corynebacterium glutamicum ltsA gene causes susceptibility to lysozyme, temperature-sensitire growth, and L-glutamate production"J.Bacteriol.. 182. 2696-2701 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] C.D.Wijayarathna: "Isolation of ftsI and murE genes involved in peptidoglycan synthesis from Corynebacterium glutamicum"Appl.Microbiol.Biotechnol.. (印刷中). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] M.Inoue: "Identification of catalytic mucleophile of Escherichia coli r-glutamyltranspeptidase by r-mono-Huorophosphono derivatire of gluramic acid ; N-terminal Thr-391 in small subunit is the nucleophile"Biochemistry. 39. 7764-7771 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] H. Suzuki: "Glutathione metabolism in Escherichia coli"J. mol. Catalysis B : Enzymatic. 6. 175-184 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] M. Wachi: "A mur C gene from coryneform bacteria"APPI. Microbiol. Biotechnol.. 51. 223-228 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] K. C. Malathi: "Isolation of the mur I gene from Brevibacterium lactofermentum ATCC13869 encoding D-glutamate racemase"FEMS Microbiol. Lett.. 175. 193-196 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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