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疾患感受性を規定するウシ主要組織適合クラスII遺伝子の分子生物学的解析

研究課題

研究課題/領域番号 11460140
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 基礎獣医学・基礎畜産学
研究機関理化学研究所

研究代表者

間 陽子  理化学研究所, 分子細胞生物学研究室, 先任研究員 (50182994)

研究分担者 岡田 幸助  岩手大学, 農学部, 教授 (50002077)
田島 茂  理化学研究所, 分子細胞生物学研究室, 基礎科学特別研究員 (60311346)
研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
16,100千円 (直接経費: 16,100千円)
2000年度: 2,300千円 (直接経費: 2,300千円)
1999年度: 13,800千円 (直接経費: 13,800千円)
キーワードBoLAクラスII遺伝子 / DNAタイピング / PCR-Seqnence-Based Typing(PCR-SBT)法 / BoLA-DRB3エクソン2 / 牛白血病ウイルス(BLV)感染牛 / 抵抗性対立遺伝子 / 多型性 / ヒツジ
研究概要

BoLAクラスII遺伝子のタイピング法の開発
正確迅速に世界中のウシMHC(BoLA)-DRB3エクソン2(BoLA-DRB3.2)の塩基配列を決定するためのPCR-Seqnence-Based Typing(PCR-SBT)法を考案した。BoLA-DRB3.2の塩基配列97種類より予測されるアミノ酸配列に基づいて対立遺伝子を8群に分類し、それそれの第一超可変部位のアミノ酸配列をコードする塩基と相補鎖を作る8種類(SPl-8)と、全ての対立遺伝子を増幅できるDRB3ALLを設計した。最初に、共通なプライマー(ERB3とHLO31)を用いてfirst PCRを、次に、その産物をテンペレートとして上述の9種類のプライマーを用いたsecond PCRを行ない、そのPCR産物の塩基配列をダイレクトシークエンス法により決定した。黒毛和腫200頭、日本単角200頭、ホルスタイン200頭およびジャージー20頭タイピングを行い、その品種間の分岐を明らかにした。
BoLAクラスII分子の多型性と白血病発症の相関関係の解明
開発した方法を用いて、牛白血病ウイルス(BLV)感染牛(未発症健康、持続性リンパ球増多症(PL)、地方病性牛白血病)のBoLA-DRB3の塩基配列を決定した。発症牛にはDRB3^*1601および^*1001が、未発症健康牛にはDRB3^*0701および^*1401が有意に多かった。予測されるアミノ酸配列を比較したところ、DRβ鎖の中でも特に多型が集中しているβ1ドメインの特定のアミノ酸配列の違い力溌症牛と未発症健康牛の間に見いだされた。即ち、リジン/アルギニン^<72>,グルタミン酸^<74>アルギニン^<77>,,バリン^<78>あるアミノ酸をコードする対立遺伝子を有する固体力がBLVによる白血病発症に対して抵抗性である可能性が示された。
ヒツジを用いたBLV感染実験
ウシで開発したBoLA DNAタイピング法を応用することによって、ヒツジMHCクラスIIのハプロタイプを決定し、ヒツジをBLVによる白血病発症に対して抵抗性および感受性の2群に分類した。さらに、BLVを実験感染させ、免疫応答能、病態の変化、白血病発症の有無と抗原提示能を比較することによって、疾患感受性の個体差の機序を探った。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (50件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (50件)

  • [文献書誌] Nagaoka, Y.: "Ovine MHC class II DRB1 alleles associated with resistance or susceptibility to development of bovine leukemia virus-induced ovine lymphoma."Cancer Res.. 59. 975-981 (1999)

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  • [文献書誌] Kabeya H.: "Up-regulation of tumor necrosis factor α mRNA is associated with bovine-leukemia virus (BLV) elimination in the early phase of infection."Vet. Immunol. Immunopathol. . 68. 255-265 (1999)

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  • [文献書誌] Inabe K.: "The YXXL sequences of a transmembrane protein bovine leukemia virus are required for vital entry and incorporation of viral envelope protein into virion."J. Virology . 73. 1293-1301 (1999)

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  • [文献書誌] Aida Y. : "The relationship between polymorphism of the MHC class II DR gene and resistance and susceptibility to bovine leukemia virus-induced lymphosarcoma"International Workshop on the potential application of recombinant cyotkines and DNA vaccine for the control of ingectiouis disease of domestic animals. 159-162 (2000)

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  • [文献書誌] Tajima S.: "The region between amino acids 245 and 265 of the Tax protein of bovine leukemia virus (BLV) restricts transactivation not only via the BLV enhancer but also via other retroviral enhancer."J. Virology . 74. 10939-10949 (2000)

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  • [文献書誌] Takeshima S.: "Identification of new bovine BoLA-DRB3 alleles by sequence-based typing."Immunogenetics. (in press.). (2001)

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  • [文献書誌] Inebe K.: "Syncytium-Forming ability and expression on the cell surface of bovine leukemia virus envelope glycoprotein are regulated by tyrosines 487 and 498 in YXXL motifs of transmembrane subunit."J. Virology,. (in press.). (2001)

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  • [文献書誌] 間陽子: "免疫応答遺伝子の多型解析を用いた抗病性ウシ作出への基礎的研究"畜産技術. 17. 24-27 (1999)

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  • [文献書誌] 田島茂: "ウシ白血病ウイルス誘発剤Bリンパ腫におけるウシp53遺伝子の変異"動物遺伝研究会誌. 27. 45-54 (1999)

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  • [文献書誌] 間陽子: "免疫応答遺伝子の多型解析を用いたウシ抗病性品種確立のための基盤技術の開発"平成10年度食肉に関する助成研究調査成果報告書. 17. 97-104 (1999)

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  • [文献書誌] 間陽子: "免疫応答遺伝子の多型解析を用いたウシ抗病性品種確立のための基盤技術の開発"平成11年度食肉に関する助成研究調査成果報告書. 18. 80-90 (2000)

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  • [文献書誌] Murakami K.: "Expression of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) receptor on B-la cell from persistent lymphocytosis (PL) cows and lymphoma cell induced by bovine leukemia virus."Vet. Immunol. Immunopathol. . 68. 49-59 (1999)

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  • [文献書誌] Hishinuma M.: "Investigation of ovarian follicular population in indigenous barotse cows of Zambia."Bull. Fac. Agric., Tottori Univ. . 53. 103-107 (2000)

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  • [文献書誌] Pan Y.: "Observation of immune pathology on cattle with enzootic bovine leukosis."Chi. J. Vet. Sci.. 20. 176-180 (2000)

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  • [文献書誌] Pan Y.: "Relationship between B lymphocyte subgroup and enzootic bovine leukosis."Chi. I. Vet. Sci.. 20. 572-575 (2000)

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  • [文献書誌] 間陽子: "獣医遺伝学入門"学窓社. 317 (1999)

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  • [文献書誌] 間陽子: "家畜ゲノム解析と新たな家畜育種戦略"社団法人畜産技術協会. 542 (2000)

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  • [文献書誌] 間陽子: "最新獣医診療ハンドブック"インターズー. 502 (1999)

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  • [文献書誌] Nagaoka Y., Kabeya H., Onuma M., Kasai N., Okada K.and Aida Y.: "Ovine MHC class II DRB1 alleles associated with resistance or susceptibility to development of bovine leukemia virus-induced ovine lymphoma"Cancer Res.. 59. 975-981 (1999)

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  • [文献書誌] Kabeya H., Ohashi K., Oyunbileg N., Nagaoka Y., Aida Y., Sugimoto C., Yokomizo Y., and Onuma M: "Up-regulation of tumor necrosis factor α mRNA is associated with bovine-leukemia virus(BLV)elimination in the early phase of infection"Vet. Immunol. Immunopathol.. 68. 255-265 (1999)

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  • [文献書誌] Inabe K., Nishizawa M.Tajima S, Ikuta K.and Aida Y.: "The YXXL sequences of a transmembrane protein bovine leukemia virus are required for viral entry and incorporation of viral envelope protein into virion."J.Virology. 73. 1293-1301 (1999)

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  • [文献書誌] Aida Y., Takeshima S., Nagaoka Y., Ikegami M., Gotoh-Inabe K., Kabeya H., Onuma M., and Okada K.: "The relationship between polymorphism of the MHC class II DR gene and resistanse and susceptibility to bovine leykemia virus-induced lymphosarcoma."International Workshop on the potential application of recombinant cytokines and DNA vaccine for the control of ingectiouis disease of domestic animals. Proceedings of the International Veterinary Cytokine and Vaccine Conference(IVCVC), Tsukuba, Ibaraki, Japan. 159-162 (2000)

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  • [文献書誌] Tajima S.and Aida Y.: "The region between amino acids 245 and 265 of the Tax protein of bovine leukemia virus(BLV)restricts transactivation not only via the BLV enhancer but also via other retroviral enhancer"J.Virology. 74. 10939-10949 (2000)

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  • [文献書誌] Takeshima S., Ikegami M., Morita M., Nakai Y.and Aida Y: "Identification of new bovine BoLA-DRB3 alleles by sequence-based typing."Immunogenetics. in press. (2001)

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  • [文献書誌] Inabe K.: "Synsytium-forming ability and expression on the cell surface of bovine leukemia virus envelope glycoprotein are regulated by tyrosines 487 and 498 in YXXL motifs of transmembrane subunit"J.Viology. in press. (2001)

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  • [文献書誌] Aida Y.: "Basic studies on production of cattle with resistance to desease using typing of polymorphism of immune response genes"Livestock Technology(in Japanese). 531. 24-27 (1999)

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  • [文献書誌] Tajima S.and Aida Y.: "Mulation of bovine p53 gene in bovine leukimia virus-induced B-cell lymphosarcoma."J.Anim. Genet. (in Japanese). 27(2). 45-54 (1999)

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  • [文献書誌] Aida Y.: "Production of cattle with resistance to disease by using typing of bovine major histocompatibility complex crass II genes3"Final reports for research grants for meart and meart products.(in Japanese). 17. 97-104 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aida Y.: "Production of cattle with resistance to disease by using typing of bovine major histocompatibility complex crass II genes"Final reports for research grants for meart and meart products.(in Japanese). 18. 80-90 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Murakami K., Inumaru S., Yokoyama T., Okada K.and Sentsui H.: "Expression of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF)receptor on B-la cell from persistent lymphocytosis(PL)cows and lymphoma cell induced by bovine leukemia virus"Vet. Immunol, Immunopathol.. 68. 49-59 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hishinuma M., Kadohira M., Patel O.V., Zulu V., Okada K., Koie H.and Sekine J.: "Investigation of ovarian follicular population in indigenous barotse cows of Zambis"Bull. Fac. Agric., Tottori Univ.. 53. 103-107 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Pan Y., Sasaki J.and Okada K.: "Observation of immune pathology on cattle with enzootic bovine leukosis"Chi. J.Vet. Sci.. 20. 176-180 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Pan Y., Wamg X., Sasaki J.and Okada K.: "Relationship between B lymphocyte subgroup and enzootic bovinr leukosis."Chi. J.Vet. Sci.. 20. 572-575 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aida Y.: "Gakusohsya"In Introduction to Veterinary Genetics(by F.W.Nicholas, Oxford University press, Inc, New York(1996)(in Japanese). (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aida Y.: "Livestock Technology Association of Japan, Tokyo, Japan"In The committee for symposium on animal breeding and genetics, editor Genome analysis of animals and new stragy for animal breeding(in Japanese). (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Aida Y.: "Interzoo, Tokyo, Japan"In Hasegawa A., editor, Veterinary Medical Care Handbook-The Latest Review(in Japanese). 391-394 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 佐々木淳,御領政信,沼宮内茂,深谷敦子,岡田啓司,岡田幸助: "好酸球増多症を伴う特発性の失神発作がみられた黒毛和種の1例."岩獣会報.. 26. 125-129 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Hishinuma,M.,Kadohira,M.,Patel,O.V.,Zulu,V.,OKada,K.,Koie,H.and Sekine,J.: "Investigation of ovarian follicular population in indigenous barotse cows of Zambia."Bull.Fac.Agric.,Tottori Univ.. 53. 103-107 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Pan,Y.,Sasaki,J.and Okada,K.: "Observation of immune pathology on cattle with enzootic bovine leukosis."Chi.J.Vet.Sci.. 20. 176-180 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Takeshima S.,Ikegami M.,Morita M.,Nakai Y.and Aida Y: "Identification of new bovine BoLA-DRB3 alleles by sequence-based typing"Immunogenetics. (in press). (2001)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Tajima S.,and Aida Y: "The region between amino acids 245 and 265 of the Tax protein of bovine leukemia virus (BLV) restricts transactivation not only via the BLV enhancer but also via other retroviral enhancer"J.Virology. 74. 10939-10949 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Aida Y.,Takeshima S.,Nagaoka Y.,Ikegami M.,Gotoh-Inabe K.,Kabeya H.,Onuma M.,and Okada K.: "The relationship between polymorphism of the MHC class II DR gene and resistance and susceptibility to bovine leykemia virus-induced lymphosarcoma"International Workshop on the potential application of recombinant cyotkines and DNA vaccine for the control of ingectiouis disease of domestic animals. 159-162 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 岡田幸助(編集委員長): "獣医病理学用語集(改定第2版)"学窓社. 260 (2000)

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      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 間陽子: "家畜ゲノム解析と新たな家畜育種戦略"社団法人畜産技術協会. 542 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 間陽子: "免疫遺伝学"獣医遺伝学入門(鈴木勝士監訳、学窓社). 160-172 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 間陽子: "免疫応答遺伝子の多型解析を用いた抗病性ウシ作出への基礎的研究"畜産技術. 531. 24-27 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 間陽子: "MHCの機能"最新獣医診療ハンドブック(長谷川篤彦監修、インターズー). 391-394 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 田島茂、間陽子: "ウシ白血病ウイルス誘発制Bリンパ腫におけるウシp53遺伝子の変異"動物遺伝研究会誌. 27. 45-54 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Nagaoka Y.et al.: "Ovine MHC class II DRB1 alleles associated with resistance or susceptibility to development of bovine leukemia virus-induced ovine lymphoma"Cancer Res.. 59. 975-981 (1999)

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      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Kabaya H.et al.: "Up-regulation of tumor necrosis factor a mRNA in the bovine leukemia virus (BLV)-resistant sheep ; for the development of effective BLV vaccine"Vet.Immunol.Immunopathol. 68. 256-265 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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