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生組織標本における細胞内情報伝達系の可視化:リアルタイム共焦点顕微鏡の応用

研究課題

研究課題/領域番号 11470007
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 解剖学一般(含組織学・発生学)
研究機関岩手医科大学

研究代表者

佐藤 洋一  岩手医科大学, 医学部, 教授 (40118253)

研究分担者 小野寺 悟  岩手医科大学, 医学部, 講師 (40137493)
渡部 剛  旭川医科大学, 医学部, 教授 (80220903)
葉原 芳昭  北海道大学, 大学院・獣医学科, 教授 (30142813)
宮田 節也  岩手医科大学, 医学部, 助手 (30316351)
斎野 朝幸  岩手医科大学, 医学部, 助手 (40305991)
春見 達郎  旭川医科大学, 医学部, 助手 (00261404)
研究期間 (年度) 1999 – 2002
研究課題ステータス 完了 (2002年度)
配分額 *注記
13,500千円 (直接経費: 13,500千円)
2002年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2001年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2000年度: 5,400千円 (直接経費: 5,400千円)
1999年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
キーワード組織バイオイメージング / 細胞内カルシウム動態 / 核内カルシウム動態 / 一酸化窒素 / 光障害 / 細胞間カルシウム伝播 / 外分泌 / 共焦点レーザー顕微鏡 / 細胞内カルシウムイオン / 細胞核内カルシウムイオン / 画像解析 / 生組織・細胞標本 / フリーラディカル / ATP
研究概要

【研究内容】
●イメージング用の、生きた状態の細胞・組織標本を作製した。<<上皮組織:角膜上皮、ニューロン:脊髄後根神経節,上頚神経節、腺細胞:涙腺,ハーダー腺、筋肉細胞:培養心筋細胞,血管平滑筋、単離細胞:肥満細胞>>
●空間的・時間的解像度に優れたリアルタイム共焦点レーザー顕微鏡を用いて、細胞質と細胞核における細胞内カルシウムイオン濃度と一酸化窒素濃度の動態の可視化をおこない、各種条件における細胞応答を観察した。
【結論】
●細動脈のカルシウム動態を観察し、刺激物質による反応性の違いや薬理作用を明らかにできた。
●末梢神経組織におけるニューロンとグリア細胞、神経周膜細胞ではATPに対する反応が異なることが示された。
●心房筋と心室筋では、カルシウム上昇パターンに関して相違が認められた。
●細胞内カルシウムイオンの動態に加え、NOの濃度測定が可能になった。
●光刺激によってカルシウム応答が刺激あるいは抑制されることが示された。
●光刺激による細胞障害に、NOS非依存性のNO産生が関与している可能性が示唆された。
●光障害防止には、レーザーパワーを落とすのが最善で、抗酸化剤などによる細胞保護作用は照射強度が低いときに有効であった。
●Gタンパク質とInsP3を介するカルシウム上昇は、核膜周辺部から始まることが示された。
●角膜上皮において,細胞成熟度に応じて細胞間カルシウム伝達に相違が認められた。
●肥満細胞で,細胞内カルシウムイオンの動態に加え、果粒放出の同時観察が可能となった。

報告書

(5件)
  • 2002 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2001 実績報告書
  • 2000 実績報告書
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (52件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (52件)

  • [文献書誌] Cui, Z.-J., Habara, Y., Satoh, Y.: "Photodynamic modulation of adrenergic receptors in the isolated rat hepatocytes"B.B.R.C.. 277. 705-710 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mori, S., Saino, T., Satoh, Y: "Effect of low temperatures on compound 48/80-induced intracellular Ca^<2+> changes and exocytosis of rat peritoneal mast cells"Arch.Histol.Cytol. 63. 261-270 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shinohe, Y., Saino, T.: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of the perineurium of peripheral nerve bundles"Histochem.Cell Biol.. 114. 497-504 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Gesase, A.P., Satoh, Y.: "Sexual differences and efects of castration on secretory mode and intracellular calcium ion dynamics of golden hamster Harderian gland"Cell Tissue Res.. 304. 81-90 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tanaka, H., Masumiya, H., Sekine T., Kase, J., Kawanishi T., Hayakawa, T., Miyata, S., Sato, Y., Nakamura, R., Shigenobu K.: "Involvement of Ca^<2+> waves in excitation-contraction coipling of rat atrial cardiomyocytes"Life Sciences. 70. 715-726 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hashikura S, Satoh, Y., Cui, A.-J., Habara Y.: "Photodynamic action inhibits compound 48/80-induced exocrine in rat peritoneal mast cells"Jpn.J.Vet.Res.. 49. 239-247 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Warashina, A., Satoh, Y.: "Modes of secretagogue-induced [Ca^<2+>]_i responses in individual chromaffin cells of the perfused rat adrenal medulla"Cell Calcium. 30. 395-401 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masumiya, H., Kase, J., Kawanishi, T., Hayakawa, T., Miyata, S., Sato, Y., Nakamura, R., Tanaka, H., Shigenobu, K.: "Effect of T-type and L-type Ca^<2+> channel blockade on early phase Ca^<2+> transients in rat atrial and ventricular cardiomyocytes"Bioimages. 9. 87-93 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kumagai, M., Saino, T.: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of neurons and satellite cells in rat superior cervical ganglia"Histochem.Cell Biol.. 115. 285-292 (2001)

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  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Satoh, Y., Saino, T: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes through gap-junctional communication in the corneal epithelium"Jap.J.Ophthalmol.. 46. 285-292 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takahashi, S., Hitomi, J., Satoh, Y., Takahashi, T., Asakura, H., Ushiki, T.: "Fine structure of the mouse portal vein in relation to its peristaltic movement"Arch.Histol.Cytol.. 65. 71-82 (2002)

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  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M., Satoh, Y.: "Application of real-time confocal microscopy to intracellular calcium ion dynamics in rat arterioles"Histochem.Cell Biol.. 117. 295-305 (2002)

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  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M., Satoh, Y.: "Comparison of the effect of ATP on intracellular calcium ion dynamics between rat testicular and cerebral arteriole smooth muscle cells"Cell Calcium. 32. 155-165 (2002)

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  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Goto, S., Saino, T., Tazawa, Y., Satoh, Y.: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes in the human corneal epithelium"Arch.Histol.Cytol.. 66(in press). (2003)

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  • [文献書誌] Gesase, A.P., Satoh, Y.: "Apocrine secretory mechanism : recent findings and unresolved problems"Histol.Histopathol.. 18(in press). (2003)

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  • [文献書誌] 佐藤洋一: "共焦点顕微鏡を用いた生組織のイメージング-特に細胞内カルシウムイオン動態の可視化について"電顕雑誌. 34. 217-219 (1999)

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  • [文献書誌] 斎野朝幸, 松浦 誠, 佐藤洋一: "高速共焦点レーザー顕微鏡を用いた細動脈における細胞内カルシウム濃度変動の画像解析"循環制御. 21. 10-16 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Cui, Z-J., Habara, Y., Satoh, Y.: "Photodynamic modulation of adrenergic receptors in the isolated rat hepatocytes"B.B.R.C.. 277. 705-710 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Mori, S., Saino, T. Satoh, Y.: "Effect of low temperatures on compound 48/80-induced intracellular Ca^<2+> changes and exocytosis of rat peritoneal mast cells"Arch. Histol. Cytol.. 63. 261-270 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shinobe, Y., Saino, T.: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of the perineurium of peripheral nerve bundles"Histochem. Cell Biol.. 114. 497-504 (2000)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Gesase, A.P., Satoh, Y.: "Sexual differences and effects of castration on secretory mode and intracellular calcium ion dynamics of golden hamster Harderian gland"Cell Tissue Res.. 304. 81-90 (2001)

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  • [文献書誌] Tanaka, H., Masumiya, H., Sekine, T., Kase, J., Kawanishi, T, Hayakawa, T., Miyata, S., Sato, Y., Nakamura, R., Shigenobu, K.: "Involvement of Ca^<2+> waves in excitation-contraction coipling of rat atrial cardiomyocytes"Life Sciences. 70. 715-726 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hashikura, S., Satoh, Y., Cui, A-J., Habara, Y.: "Photodynamic action inhibits compound 48/80-induced exocrine in rat peritoneal mast cells"Jpn. J. Vet. Res.. 49. 239-247 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Warashina, A., Satoh, Y.: "Modes of secretagogue-induced [Ca^<2+>]_i responses in individual chromaffin cells of the perfused rat adrenal medulla"Cell Calcium. 30. 395-401 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Masumiya, H., Kase, J., Kawanishi, T., Hayakawa, T., Miyata, S., Sato, Y., Nakamura, R., Tanaka, H., Shigenobu, K.: "Effect of T-type and L-type Ca^<2+> channel blockade on early phase Ca^<2+> transients in rat atrial and ventricular cardiomyocytes"Bioimages. 9. 87-93 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kumagai, M., Saino, T.: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of neurons and satellite cells in rat superior cervical ganglia"Histochem. Cell Biol.. 115. 285-292 (2001)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Satoh, Y., Saino, T.: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes through gap-junctional communication in the corneal epithelium"Jap. J. Ophthalmol.. 46. 479-487 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Takahashi, S., Hitomi, J., Satoh, Y., Takahashi, T., Asakura, H., Ushiki, T.: "Fine structure of the mouse portal vein in relation to its peristaltic movement"Arch. Histol. Cytol.. 65. 71-82 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M., Satoh, Y.: "Application of real-time confocal microscopy to intracellular calcium ion dynamics in rat arterioles"Histochem. Cell Biol.. 117. 295-305 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M. and Satoh, Y.: "Comparison of the effect of ATP on intracellular calcium ion dynamics between rat testicular and cerebral arteriole smooth muscle cells"Cell Calcium. 32. 155-165 (2002)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Goto, S., Saino, T., Tazawa, Y., Satoh, Y.: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes in the human corneal epithelium"Arch. Histol. Cytol.. 66 (in press). (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Gesase, A.P., Satoh, Y.: "Apocrine secretory mechanism: recent findings and unresolved problems"Histol. Histopathol.. 18 (in press). (2003)

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      2002 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Satoh, Y., Saino, T.: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes through gap-junctional communication in the corneal epithelium"Jap. J. Ophthalmol.. 46. 479-487 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M., Satoh, Y.: "Application of real-time confocal microscopy to intracellular calcium ion dynamics in rat arterioles"Histochem. Cell Biol.. 117. 295-305 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Saino, T., Matsuura, M., Satoh, Y.: "Comparison of the effect of ATP on intracellular calcium ion dynamics between rat testicular and cerebral arteriole smooth muscle cells"Cell Calcium. 32. 155-165 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Kubo-Watanabe, S., Goto, S., Saino, T., Tazawa, Y., Satoh, Y.: "ATP-induced [Ca^<2+>]_i changes in the human corneal epithelium"Arch. Histol. Cytol.. 66(in press). (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Gesase, A.P., Satoh, Y.: "Apocrine secretory mechanism : recent findings and unresolved problems"Histol. Histopathol.. 18(in press). (2003)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Kumagai M, Saino T: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of neurons and satellite cells in rat superior cervical ganglia"Histochem. Cell Biol.. 115. 285-292 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Gesase AP, Satoh Y: "Sexual differences and effects of castration on secretory mode and intracellular calcium ion dynamics of golden hamster Harderian gland"Cell Tissue Res. 304. 81-90 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Warashina A, Satoh Y: "Modes of secretagogue-induced [Ca^<2+>]_i responses in individual chromaffin cells of the perfused rat adrenal medulla"Cell Calcium. 30. 395-401 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Masumiya H, Kase J, Kawanishi T, Hayakawa T.Miyata S, Sato Y, Nakamura R, Tanaka H, Shigenobu K: "Effect of T-type and L-type Ca^<2+> channel blockade on early Phase Ca^<2+> transients in rat atrial and ventricular cardiomyocytes"Bioimages. 9. 87-93 (2001)

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      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Hashikura S, Satoh Y, Cui ZJ, Habara Y: "Photodynamic action inhibits compound 48/80-induced exocytosis in rat peritoneal mast cells"Jpn J Vet Res. 49. 239-247 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Tanaka H, Masumiya H, Sekine T, Kase J, Kawanishi T, Hayakawa T, Miyata S, Sato Y, Nakamura R, Shigenobu K: "Involvement of Ca^<2+> waves in excitation-contraction coupling of rat atrial cardiomyocytes"Life Sciences. 70. 715-726 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Cui Z-J,Habara Y,Satoh Y: "Photodynamic modulation of adrenergic receptors in the isolated rat hepatocytes"BBRC. 277(3). 705-710 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Mori S,Saino T,Satoh Y: "Effect of low temperatures on compound 48/80-induced intracellular Ca2+ changes and exocytosis of rat peritoneal mast cells."Arch.Histol.Cytol.. 63. 261-270 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Shinohe Y,Saino T: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of the perineurium of peripheral nerve bundles."Histochem.Cell Biol.. 114. 497-504 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kumagai M,Saino T: "Effects of ATP on intracellular calcium dynamics of neurons and satellite cells in rat superior cervical ganglia."Histochem.Cell Biol.. (in press). (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 斎野朝幸,松浦誠,佐藤洋一: "高速共焦点レーザー顕微鏡を用いた細動脈における細胞内カルシウム濃度変動の画像解析。"循環制御. 21. 10-16 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 日本組織細胞化学会編: "高速共焦点レーザー顕微鏡によるCa^<2+>のマッピング."組織細胞化学2000""学際企画. 168(5) (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 佐藤洋一: "[技術情報]共焦点顕微鏡を用いた生組織のイメージング"電子顕微鏡. 34・3. 217-219 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 平藤雅彦、佐藤洋一、南勝: "[実験技術]腸クロム親和性細胞の細胞内カルシウム動態解析法"日薬理誌. 114. 357-363 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 石川春律 監修: "バイオイメージングの最先端"先端医療技術研究所. 324 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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