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新規バイオ素材による人工カプセルの構築

研究課題

研究課題/領域番号 11470078
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 ウイルス学
研究機関東京工業大学

研究代表者

半田 宏  東京工業大学, フロンティア創造共同研究センター, 教授 (80107432)

研究分担者 渡辺 肇  岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助教授 (80212322)
有坂 文雄  東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 助教授 (80133768)
研究期間 (年度) 1999 – 2000
研究課題ステータス 完了 (2000年度)
配分額 *注記
12,300千円 (直接経費: 12,300千円)
2000年度: 5,300千円 (直接経費: 5,300千円)
1999年度: 7,000千円 (直接経費: 7,000千円)
キーワードSV40 / AAV / カプシドタンパク質 / ウイルス様粒子 / 組換えタンパク質 / ウイルス粒子様粒子 / 組み換えプラスミド
研究概要

SV40やAAVのウイルス粒子は、それぞれ主要なカプシドタンパク質であるVP1およびVP3によって外側を被覆されている。これらをバキュロウイルス発現系を用いて昆虫細胞内で発現すると、SV40ではVP1のみでウイルス様粒子(VLP)が形成され、AAVでは核移行シグナルを付加するとVP3のみでVLPが形成されることを見出した。そのSV40のVLPを回収効率良く精製し、試験管内でペンタマーにまで解離、分散し、VLPを効率良く再構成する条件を設定した。その再構成には、カルシウムイオンとその結合部位およびヂスルフィド結合が関与することを見出し、それに関与するいくつかのドメインおよびアミノ酸残基を決定した(J.Virol.,75,61-72,2001)。また、その中にプラスミドDNAを包含するために、DNAコンパクションに関与すると示唆されているVP2やVP3の組換えタンパク質を大量に調製し、それらの機能を検討する実験系を確立した。さらに、新規機能を付加したVLPを構築するために、VP1の改変体を遺伝子工学的に作製して、それらのVLP形成能を検討した結果、VP1は極めて堅い構造をしたタンパク質であるが、粒子表面に露出されるいくつかの部位の中から新規機能を付加することが可能である部位を見出した。

報告書

(3件)
  • 2000 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (34件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (34件)

  • [文献書誌] M.Hoque,K.Ishizu,Handa, et al.: "Nuclear transport of the major capsid protein is essential for the capsid formation of adeno-associated virus."J.Virol.. 73. 7912-7915 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Hoque,K.Ishizu,Handa, et al.: "Chimeric virus-like particle formation of adeno-associated virus."Biochem.Biophysic.Res.Commun.. 266. 371-376 (1999)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Takayama,H.Handa, et al.: "Transfer of SV40 temperature-sensitive early gene into human epidermal keratinocytes by the recombinant adenovirus vector"In Vitro Cell.Dev.Biol.. 36. 110-116 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Shimizu,H.Watanabe,H.Handa, et al.: "High-performance affinity beads for identifying drug receptors"Nature Biotechnology. 18. 877-881 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Guo,Y.Yamaguchi,T.Wada,H.Handa, et al.: "A regulator of transcriptional elongation controls vertebrate neuronal development"Nature. 408. 366-369 (2000)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K-I,Ishizu,H.Watanabe,H.Handa, et al.: "Roles of Disulfide Linkage and Calcium Ion-Mediated Interactions in Assembly and Disassembly by Virus-Like Particles Composed of Siman Virus 40 VP1 Capsid Protein"Journal of Virology. 75. 61-72 (2001)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Nagata,H.Handa (Eds.): "Real-Time Analysis of Biomolecular Interactions Application of BIACORE"Springer. 256 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 半田宏,石井俊輔,山本雅之,藤井義明 共編: "ゲノムからの情報発現-転写因子とその機能"シュプリンガー・フェアラーク東京. 238 (2000)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Aizawa, M.Nakano, O.Iwase, M.Yaguchi, M.Hiramoto, H.Hoshi, R.Nabeshima, D.Shima, H.Handa and K.Toyama.: "Bone marrow stroma from refractory anemia of myelodysplastic syndrome is defective in its ability to support normal CD34-positive cell proliferation and differentiation in vitro."Leuk.Res.. 23. 239-246 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Yamaguchi, T.Takagi, T.Wada, K.Yano, A.Furuya, S.Sugimoto, J.Hasegawa and H.Handa.: "NELF, a multiple complex containing RD, cooperates with DSIF to repress RNA plymerase II elongation."Cell. 97. 41-51 (1999)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Yamaguchi, T.Wada, D.Watanabe, T.Takagi, J.Hasegawa and H.Handa: "Structure and function of the human transcription elongation factor DSIF."J.Biol.Chem.. 274. 8085-8092 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Satoh, M.Hijikata, H.Handa and S.Shimotono.: "Caspase-mediated cleavage of eukaryotic translation initiation factor subunit 2α."Biochem.J.. 342. 65-70 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Hashimoto, K.Chayama, M.Kobayashi, A.Tsubota, Y.Arase, S.Saitou, Y.Suzuki, K.Ikeda, M.Matsuda, H.Koike, M.Kobayashi, H.Handa, and H.Kumada: "Fluctuations of hepatitis C virus load are not related to amino acid substitutions in hyper variable region I and interferon sensitivity determining region."J.Med.Virol.. 58. 247-255 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Hoque, K.Ishizu, A.Matsumoto, S-I.Han, F.Arisaka, M.Takayam, K.Suzuki, T.Kanda, K.Kato, H.Watanabe and H.Handa: "Nuclear transport of the major capsid protein is essential for the capsid formation of adeno-associated virus."J.Viorl.. 73. 7912-7915 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Hoque, N.Shimizu, K-I.Ishizu, H.Yajima, F.Arisaka, K.Suzuki, H.Watanabe, and H.Handa: "Chimeric virus-like particle formation of adeno-associated virus."Biochem.Biophysic.Res.Commun.. 266. 371-376 (1999)

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      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Takayama, E.Kim, M.Kidokoro, K.Shimamura, K.Shiroki, H.Yajima, S.Ito, H, Handa and S.Inokuchi.: "Transfer of SV40 temperature-sensitive early gene into human epidermal keratinocytes by the recombinant adenovirus vector."In Vitro Cell.Dev.Biol.. 36. 110-116 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Shimizu, K.Sugimoto, J.Tang, M.Hiramoto, S.Aizawa, A.Oomori, H.Watanabe, H.Tanaka, H.Kawaguchi and H.Handa.: "High performance affinity beads for identification of drug receptors."Nature Biotechnol.. 18. 877-881 (2000)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K-I.Ishizu, H.Watanabe, S-I.Han, S-N.Kanesashi, M.Hoque, H.Yajima, K.Kataoka and H.Handa.: "The roles of disulfide linkage and calcium ion-mediated interactions in assembly and disassembly by virus-like particles composed of SV40 VP1 capsid protein."J.Virol.. 75. 61-72 (2001)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2000 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Takayama,H.Handa, et al.: "Transfer of SV40 temperature-sensitive early gene into human epidermal keratinocytes by the recombinant adenovirus vector"In Vitro Cell.Dev.Biol.. 36. 110-116 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Araki-Sasaki,H.Handa, et al.: "Sabstance P-Induced cadherin expression and its signal transduction in a cloned human corneal epithelial cell line"J.Cell.Physiol.. 182. 371-376 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] T.Wada,Y.Yamaguchi,H.Handa, et al.: "FACT relieves DSIF/NELF-mediated inhibition of transcription elongation and reveals functional differences between P-TEFb and TFIIH"Mol.Cell. 5. 1067-1072 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] N.Shimizu,H.Watanabe,H.Handa, et al.: "High-performance affinity beads for indentifying drug receptors"Nature Biotechnology. 18. 877-881 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] S.Guo,Y.Yamaguchi,T.Wada,H.Handa, et al.: "A regulator of transcriptional elongation controls vertebrate neuronal development"Nature. 408. 366-369 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K-I,Ishizu,H.Watanabe,H.Handa, et al.: "Roles of Disulfide Linkage and Calcium Ion-Mediated Interactions in Assembly and Disassembly by Virus-Like Particles Composed of Siman Virus 40 VP1 Capsid Protein"Journal of Virology. 75. 61-72 (2001)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] K.Nagata,H.Handa (Eds.): "Real-Time Analysis of Biomolecular Interactions Application of BIACORE"Springer. 256 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] 半田宏,石井俊輔,山本雅之,藤井義明 共編: "ゲノムからの情報発現-転写因子とその機能"シュプリンガー・フェアラーク東京. 238 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Yamaguchi et.al.: "NELF,a multisubunit complex containing RD,cooperates with DSIF to repress RNA polymerase II elongation"Cell. 97. 41-51 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] B.R.Cairns et.al.: "Two functionally distinct forms of RSC nucleosome-remodeling complex,containing essential AT hook,BAH,and bromodomains"Mol.Cell. 4・5. 715-723 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] A.M.Dudley,C.Ragelle,&F.Winston: "The Spt components of SAGA facilitate TBP binding to a promoter at a post-activator-brinding step in vivo"Genes Dev.. 13・22. 2940-2945 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] P.B.Kamaruitsky,B.Michel & S.Buratowski: "TFIIO-specitic yeast TAF40 is essential for the majority of RNA polymerase II-mediated transcription in vivo"Genes Dev. 13. 2484-2489 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] C.R.Rodriguez et.al.: "Kin 28,the TFIIH-associated carboxy-terminal domain Kinase,facilitate the recruitment of mRNA processing in machinery to RNA polymene II"Mol.Cell.Biol. 20. 104-112 (2000)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] M.Hogue,H.HANDA et.al.: "Nudear Transport of the Major Capsid Protein is Essential for Adeno-Associated Virus Capsid Formation"Journal of Virology. 73. 7912-7915 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 半田 宏 共著: "環境ホルモン汚染対策〜測定・評価から企業対応まで〜"株)エヌ・ティー・エス. 426 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] 村松正實 山本 雅 編: "実験医学別冊新訂 新遺伝子工学ハンドブック改訂第3版"羊工社. 360 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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