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初期発生胚における雌雄性差の検出

研究課題

研究課題/領域番号 11480220
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 発生生物学
研究機関大阪大学

研究代表者

岡部 勝  大阪大学, 遺伝情報実験センター, 教授 (30089875)

研究分担者 伊川 正人  大阪大学, 遺伝情報実験施設, 助手 (20304066)
研究期間 (年度) 1999 – 2001
研究課題ステータス 完了 (2001年度)
配分額 *注記
13,400千円 (直接経費: 13,400千円)
2001年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
2000年度: 4,200千円 (直接経費: 4,200千円)
1999年度: 5,000千円 (直接経費: 5,000千円)
キーワード雌雄の分化 / 性染色体 / GFP / X染色体 / 性別判定 / トランスジェニックマウス / 雌雄分別 / ディファレンシャルディスプレイ
研究概要

本研究は、性染色体にGFP遺伝子を導入した遺伝子改変マウスを作製し、これまで不可能であった非侵襲的な着床前胚の性別判定を行うというアプローチにより、簡便な雌雄の産み分け法の確立を目的に行ったものである。
これまでに、GFP遺伝子をX染色体に導入したマウスを使うことにより、GFP由来の蛍光の有無で雌雄の判別を着床前の発生段階で100%正確に行えることを実証した。この結果に基づき、合計6000個にのぼる受精卵についてGFPの蛍光をもつ雌胚と蛍光をもたない雄胚に選別し、ディファレンシャルディスプレイ法やサブトラクション法を用いて遺伝子発現の差異をRNAレベルで解析した。その結果、雌胚特異的に発現する遺伝子としてマーカーとして発現させたGFP遺伝子を含む数個の遺伝子が検出された。しかし、残念ながらディファレンシャルディスプレイ法により検出された遺伝子の発現を再び、雌雄の卵子において検証したが明らかな差異をもつ遺伝子として検証することができなかった。
さらに、サブトラクション法をもちいて差異のある遺伝子の検出を試みた。その結果、現在合計20個程度の雄胚特異的遺伝子、雌胚特異的遺伝子の候補をとることができた。これまでに約半数のものについて雌雄胚での差を検証したが明らかな差異を示すものは得られていない。しかし、初期胚特異的に発現する遺伝子群を単離することができたのでこれらの発生における役割を遺伝子ノックアウトなどの系を含めて検証を行う基礎が固められた。

報告書

(4件)
  • 2001 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2000 実績報告書
  • 1999 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] Nakanishi T et al.: "Real-time observation of acrosomal dispersal from mouse sperm using GFP as a marker"FEBS lett. 449(2-3). 277-283 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kondoh G et al.: "Tissue-inherent fate of GPI revealed by GPI-anchored GFP transgenesis"FEBS lett. 458(3). 299-303 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fujikawa N et al.: "Depolarization-dependent survival of cultured mouse cerebellar granule neurons is"European Journal of Neuroscience. 12. 1838-1842 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikawa M et al.: "Calmegin is required for fertilin alpha/beta heterodimerization and sperm fertility"Dev Biol. 240(1). 254-261 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakanishi T et al.: "Alkalinization of acrosome measured by GFP as a pH indicator and its relation to sperm"Dev Biol. 237(1). 222-231 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakanishi T et al.: "Real-time observation of acrosomal dispersal from mouse sperm using GFP as a marker protein"FEBS Lett. 449(2-3). 277-283 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Kondoh G et al.: "Tissue-inherent fate of GPI revealed by GPI-anchored GFP transgenesis"FEBS Lett. 458(3). 299-303 (1999)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fujikawa N et al.: "Depolarization-dependent survival of cultured mouse cerebellar granule neurons is strain-restrained"European Journal of Neuroscience. 12. 1838-1842 (2000)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikawa M et al.: "Calmegin is required for fertilin alpha/beta heterodimerization and sperm fertility"Dev Biol. 240(1). 254-261 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nakanishi T et al.: "Alkalinization of acrosome measured by GFP as a pH indicator and its relation to sperm capacitation"Dev Biol. 237(1). 222-231 (2001)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      2001 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Ikawa M. et al.: "Calmegin Is Required for Fertilin α/B Heterodimerization and Sperm Fertility"Dev. Biol.. 240. 254-261 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Nakanishi T. et al.: "Alkalinization of Acrosome Measured by GFP as a pH Indicator and Its Relation to Sperm Capacitation"Dev. Biol.. 237. 222-231 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] 中西 友子 他: "「体外受精-Update」"鈴木 秋悦. 360 (2001)

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書
  • [文献書誌] Keng,V.W. et al.: "Homeobox gene hex is essential for onset of mouse embryonic liver development and differentiation of the monocyte lineage"Biochem Biophys Res Commun. 276(3). 1155-61 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Fujisawa,N. et al.: "Depolarization-dependent survival of cultured mouse cerebellar granule neurons is strain-restarained"European Journal of Neuroscience. 12. 1-5 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Arvola,M. et al.: "Immunoglobulin-secreting cells of maternal origin can Be detected in B cell-deficient mice"Biol Reprod. 63(6). 1817-24 (2000)

    • 関連する報告書
      2000 実績報告書
  • [文献書誌] Kondoh G.et al.: "Tissue-inherent fate of GPI revealed by GPI-anchored GFP transgenesis"FEBS Lett. 458. 299-303 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書
  • [文献書誌] Nakanishi T. et al.: "Real-time observation of acrosomal dispersal from mouse sperm using GFP as a marker protein"FEBS Lett. 449(2-3). 277-283 (1999)

    • 関連する報告書
      1999 実績報告書

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公開日: 1999-04-01   更新日: 2016-04-21  

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