| 研究課題/領域番号 |
11557187
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
医薬分子機能学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
葛巻 暹 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 教授 (80091445)
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| 研究分担者 |
篠原 信雄 北海道大学, 医学部・附属病院, 講師 (90250422)
藤田 寿一 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助手 (30212187)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
6,000千円 (直接経費: 6,000千円)
2000年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
1999年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
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| キーワード | ゲルソリン / 膀胱癌 / 遺伝子治療 / アデノウイルス / ヌードマウス / β-gal |
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| 研究概要 |
膀胱癌の初期治療時に残存した癌細胞へ癌抑制機能を持つゲルソリン遺伝子をアデノウイルスベクターに組み込み移入して完治を目指す遺伝子標的治療法を、マウスのオルソトピックモデルにおいて検討した。
1. ゲルソリンアデノウイルスベクター(Ad-GSN)をヒト膀胱癌細胞株2株(UMUC-2,KU-7)に感染させ、各細胞株においてゲルソリンの発現が増加することをウエスタンブロット法で確認した。これらの感染株では、in vitroにおける細胞増殖が約70%抑制された。
2. Ad-GSNウイルスベクター感染によるKU-7での細胞周期の変化を検討するために、感染前後でのDNA分布をフローサイトメトリーによって検討した。Ad-βgal感染細胞では、細胞周期の変化はわずかであった。一方、Ad-GSN感染細胞では、G2/M期が18.8%から28.4%へと増加したのに比べ、G1/Sは70.4%から56.8%へと、減少していた。これらの結果は、Ad-GSNによる細胞増殖抑制効果が、G2/M期での細胞周期の延長または停止によるものであることを示した。
3. KU-7をヌードマウスの膀胱内に経尿道的に移植し、1×10^9PFUのAd-GSNまたはAd-β-galを3日間経尿道的に投与した。10日後に犠牲死させ、膀胱をホルマリン固定ののちHE染色を行い、各腫瘍の面積をNIH imageにて測定したところ、Ad-GSN投与群では、Ad-β-gal投与群に比べ腫瘍面積が約9分の1に縮小していた。
以上のことから、ゲルソリンアデノウイルスゲクターは、ヒト膀胱癌細胞株のin vitroおよびin vivoでの増殖を抑制し、膀胱癌に対する遺伝子治療に用いられる可能性が確認された。
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