| 研究課題/領域番号 |
11650837
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
工業分析化学
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| 研究機関 | 同志社大学 |
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研究代表者 |
塚越 一彦 同志社大学, 工学部, 助教授 (60227361)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
2000年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
1999年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | ギャピラリー電気泳動 / 化学発光 / 高感度分析 / ルミノール / 光ファイバー / 分離・検出 / キャピラリー電気泳動 / 高感度 |
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| 研究概要 |
本研究では、キャピラリー電気泳動(CE)-化学発光(CL)検出法における、装置・操作性の簡略化および高感度化を目指して、光ファイバーを利用したCL検出セルを考案、作成した。
光ファイバー検出セルは、容量8mlの反応液リザーバー中に、光ファイバーとキャピラリーを同軸上で固定した。また、接地電極としての白金線を同様の反応液リザーバー中に固定した。キャピラリー末端から流れ出た被検体は、反応液リザーバー中の化学発光試薬と混合され発光する。この光は、光ファイバーにより光電子増倍管(PMT)へと導かれた。PMTからの出力は、フォトンカウンターで測定し、インテグレーターで記録積算された。
本法によってまずルミノールを泳動・検出した。検出限界は5.0x10^<-10>M(10アトモル;S/N=3)であり、直線定量範囲は3桁以上、相関係数は0.999であった。検出下限は、これまで報告されたCEにおけるルミノールの検出下限としては最も小さな値であった。また、理論段数は20000-30000であり、ピーク高さの相対標準偏差は3%以下であった。いずれも本法が高い分離効率と測定精度を有することを示した。また、Gly、GlyGly、GlyGlyGlyの混合試料の分離・検出も可能であった。
本CL検出器の使用によって、発光試薬を送液するための高性能ポンプは不要になった。また、複雑なミキシングジョイントおよび反応セルも不要となった。装置の大幅な簡略化とともに、化学発光検出の特徴を最大限に生かし、アトモルオーダーの超高感度分析が可能になった。
本法は、キャピラリー等電点電気泳動にも利用された。また、過シュウ酸エステル系の化学発光にも応用された。さらに、光ファイバーを用いたフロー型検出セルも考案された。
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