研究課題/領域番号 |
11660045
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
植物保護
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研究機関 | 三重大学 |
研究代表者 |
小林 一成 三重大学, 生物資源学部, 助教授 (90205451)
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研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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配分額 *注記 |
3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
2000年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1999年度: 3,000千円 (直接経費: 3,000千円)
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キーワード | Rac低分子量Gタンパク / PRタンパク / サリチル酸 / 感染防御応答 / 形質転換体 / タバコ / 細胞骨格 / アクチン / Rac GTP結合タンパク質 / 病害抵抗性 / 環境ストレス耐性 / 高等植物 |
研究概要 |
タバコおよびオオムギより、アクチンおよびアクチン細胞骨格の制御に関与するRac遺伝子のクローニングに成功した。いずれの植物においても各遺伝子は多重遺伝子族を形成しており、cDNAライブラリーからのスクリーニングにより、複数の異なるクローンが得られた。各遺伝子の発現を調べたところ、器官や発育ステージ、病原菌接種を含む各種環境ストレス下で遺伝子毎に発現パターンが異なっていた。タバコRacのうち、C末端の構造が異なるNtRac1およびNtRac3を過剰発現する形質転換タバコを作出した。いずれの形質転換体にも形態的に判断できる明瞭な表現型は現れなかった。また、従来から考えられているアクチン細胞骨格の構築状態制御や活性酸素種の生合成にも変化は認められなかった。そこで、これらの遺伝子には未知の機能があると考え、それぞれの形質転換体の病傷害ストレス応答性を検討した。この結果、NtRac3過剰発現体では病害ストレス特異的に誘導されるPR-1a遺伝子が自発的に発現しており、同時にサリチル酸の蓄積量およびサリチル酸に対する感受性の増高が認められた。さらに、病原菌を接種した場合にはPR-1aの発現が迅速かつ高レベルに誘導され、形質転換親に比べて病害抵抗性レベルも高まっていると考えられた。一方、NtRac1アクティブ型を発現する形質転換体にはPR-1aおよびサリチル酸に変化がなかったのに対し、NtRac1ドミナントネガティブ型を発現する形質転換体では強いPR-1aの発現とサリチル酸蓄積が認められた。これらの事実は、NtRac1およびNtRac3はともにサリチル酸を介する病害応答シグナル伝達系の調節因子であるが、前者は負の調節に関与するのに対し、後者は正の調節に関与することを示唆している。以上の結果は、タバコRac遺伝子が病害抵抗性植物を分子育種するためのターゲットになる可能性を示している。
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