| 研究課題/領域番号 |
11660096
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
応用微生物学・応用生物化学
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| 研究機関 | 慶應義塾大学 |
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研究代表者 |
西沢 正文 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20218150)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
3,800千円 (直接経費: 3,800千円)
2000年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1999年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
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| キーワード | 細胞周期 / 酵母 / サイクリン依存性キナーゼ / 糖代謝 / ジーンチップ / G_1期 / M期 / 糖新生系 / グリコーゲン代謝系 |
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| 研究概要 |
1.Pho85キナーゼのG1期における役割の解明cln1cln2pho85^<ts>株の制限温度下での生育停止を抑圧する遺伝子の単離を行っているが、まだ単離に成功していない。
2.Pho85キナーゼのM期終了における役割の解明Pho85キナーゼとClb2の安定性の関係を調べたところ、野生型とpho85欠失株の間で大きな差は見られなかった。マウスCdk5キナーゼがpho85欠失変異形質の内、細胞の異常形態、Pho4過剰発現による細胞の生育停止などを抑圧できることを見いだした。これらの抑圧には特定のサイクリンが必要であること、Cdk5キナーゼはPho4をリン酸化できることから、Cdk5キナーゼはPho85キナーゼの機能的相同体であると結論した。Cdk5キナーゼはPho85キナーゼのM期終了における役割を特異的に代替できる可能性が考えられる。この性質を利用してCdk5キナーゼの活性を制御する因子を酵母を用いてスクリーンした。現在いくつかの候補cDNAクローンが得られており、それらの解析を行っている。
3.Pho4の標的の探索ジーンチップを用いた解析の結果、糖新生系やグリコーゲン代謝系酵素遺伝子の発現が、pho85欠失変異で特異的に変動することがわかった。この中で必須遺伝子であるUGP1の発現制御に着目し詳しく解析し、UGP1発現はPho4を介してPho85キナーゼによって制御されることを報告した。
4.Pho85-サイクリン複合体の標的の探索Pho85のサイクリンは10種類あり、しかも機能が重複しているためそれぞれの標的を同定することが難しい。この問題を解決するためにPho85とそれぞれのサイクリンの融合タンパク質を発現させ、その機能を解析したところ、特定のサイクリンとの組み合わせが特定の機能に必要であることがわかった。
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