| 研究課題/領域番号 |
11670465
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
内科学一般
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
加藤 智啓 聖マリアンナ医科大学, 難病治療研究センター, 助教授 (80233807)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
2000年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
1999年度: 2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
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| キーワード | 全身性自己免疫疾患 / 慢性関節リウマチ / 全身性エリテマトーデス / MHC / T細胞 / T細胞抗原 / ファージ / ペプチドライブラリー |
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| 研究概要 |
慢性関節リウマチや全身性エリテマトーデスなどの膠原病は難治性の全身性自己免疫疾患である。以前に我々は全身性エリテマトーデス患者末梢血や腎臓で非常に強いオリゴクローナルなT細胞の増殖が認められること、慢性関節リウマチにおいても特定のT細胞がオリゴクローナルに滑膜に集積していることなどを報告してきた。これらから、この増殖T細胞クローンの抗原を同定することが膠原病病因解析、ひいては抗原特異的治療法の開発につながると考えられ、本研究では抗原性未知のT細胞の抗原を同定する方法の確立を目的とした。そのためにMHC分子付ペプチドライブラリーをファージを用いて作成し、同様に1個のT細胞からクローニングした再構築T細胞受容体を用いてスクリーニングする可能性を検討した。具体的にはヒト・及びマウスのMHCのクラスI分子としてHLA B5lOl分子、H-2Dbをヒトβ2-マイクログロブリン遺伝子と共にファージ上に発現させ、これが実際に抗原ペプチドを結合することを証明した。また、患者検体から集積T細胞のTCRα鎖とβ鎖の遺伝子を、細胞を株化すること無しにペアでクローニングでき、大腸菌で1本鎖TCRとして発現できることを発見した。ランダムペプチドMHCファージライブラリーの構築が可能であると考えられた。今後のライブラリーの作成と実際のスクリーニングにより自己免疫疾患患者で病因論的治療的意義をもつT細胞の抗原の同定に役立つと考えられる。
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