| 研究課題/領域番号 |
11670504
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
消化器内科学
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| 研究機関 | 鳥取大学 |
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研究代表者 |
川崎 寛中 (川崎 廣中) 鳥取大学, 医学部, 教授 (60108826)
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| 研究分担者 |
汐田 剛史 鳥取大学, 医学部・附属病院, 講師 (70263457)
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| 研究期間 (年度) |
1999 – 2000
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| 研究課題ステータス |
完了 (2000年度)
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| 配分額 *注記 |
3,900千円 (直接経費: 3,900千円)
2000年度: 1,400千円 (直接経費: 1,400千円)
1999年度: 2,500千円 (直接経費: 2,500千円)
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| キーワード | 肝幹細胞 / 劇症肝炎 / HGF / 遺伝子治療 / シグナル伝達 |
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| 研究概要 |
肝幹細胞(oval cell)出現のモデルとして、2一AAF投与後に70%部分肝切除(PH)を加えるSolt-Farberモデルを用いた。すなわち、徐放性のAAFを皮下投与し、成熟肝細胞の増殖を抑制し、7日後にPHを施行し、oval cellの出現を誘導した。直後にアデノウイルスベクターに組み込んだHGFcDNA遺伝子(pAxCAHGF)を尾静脈より投与した群(I群)と投与しない群(II群)で、投与4日、7日、9日、13日でoval cellの増殖を検討しな。pAxCAHGFはE1、E3を欠如し、CAGプロモーター制御下にラットHGF遺伝子を導入している。I群では4日後をピークにHGFmRNA発現が増加し、II群ではHGFの発現を認めなかった。oval cellはI群、II群共に4日後より増加し、9日後をピークに増加した。I群ではII群に比較し、有意にoval cellの数が増加していた。S期にあるPCNA陽性oval cellがI群ではII群に比較し有意に増加していた。この際、SCFとc-kit mRNAと蛋白量は増加しており、oval cellでSCF/c-kitがオートクラインに作動していることが示された。以上より、HGF遺伝子導入が生体でのoval cell増殖を介した肝再生に促進的に働いていることが示唆された。
ラットoval cell lineであるOC/CDE6へpAxCAHGFを投与し、細胞増殖とシグナル伝達を検討している。すなわちpAxCAHGFを投与したI群とpAxCALacZを投与したII群で検討した。pAxCAHGF投与後、2日後にHGFが発現し、細胞数は4日後には明らかに増加していた。この際、MAPK、PI3K、Aktのどの経路でシグナル伝達しているか検討しているが、PI3Kの経路が重要であることを示した。
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